[發明專利]人臍帶間充質干細胞復合細胞因子在制備修復皮膚損傷的生物制劑中的應用

有效

• 申請號: 201410273905.6
• 申請日: 2014-06-19
• 公開（公告）號: CN104027794A
• 公開（公告）日: 2014-09-10
• 發明（設計）人: 徐妍;郭世磊;周炳榮
• 申請（專利權）人: 徐妍
• 主分類號: A61K38/19
• 分類號: A61K38/19;A61P17/00
• 代理公司: 南京正聯知識產權代理有限公司 32243
• 代理人: 盧霞

1.人臍帶間充質干細胞復合細胞因子在制備修復皮膚損傷的生物制劑中的應用，所述的皮膚損傷包括激光灼傷，也可以是熱灼傷、冷凍傷或普通外傷皮膚物理化學性損傷，其特征在于，所述的復合細胞因子為人臍帶間充質干細胞所分泌的細胞因子，所述的人臍帶間充質干細胞復合細胞因子通過以下步驟制備而得：

1）從人臍帶組織中提取臍帶間充質干細胞；

2）將臍帶間充質干細胞在體外進行擴增培養；

3）臍帶間充質干細胞換用無血清的條件培養基進行培養，并且將培養基進行收集；

4）將條件培養基進行離心純化，截留分子量3.5kDa的物質；

5）將離心后培養基（含>3.5kDa分子）進行透析濃縮，得到濃縮液；

6）將濃縮液進行凍干處理，得到人臍帶間充質干細胞復合細胞因子凍干粉。

2.根據權利要求1所述的應用，其特征在于，所述的人臍帶間充質干細胞復合細胞因子通過以下步驟制備而得：

1）臍帶間充質干細胞的提取：通過抽脂手術以及其他手術中獲取的人體臍帶組織為原料，通過膠原酶消化后離心提取臍帶間充質干細胞，將臍帶間充質干細胞接種于培養皿中在飽和濕度5%二氧化碳濃度，37°C恒溫下培養；

2）人臍帶間充質干細胞的擴增培養：人臍帶間充質干細胞為長梭形貼壁培養細胞，待細胞生長至80-90%融合時進行傳代培養；

3）人臍帶間充質干細胞條件培養基的收集：培養細胞至第三代，融合率達到80-90%進行細胞因子的收集，應用無血清培養基進行細胞正常培養后，將經過培養的無血清培養基進行收集；

4）人臍帶間充質干細胞條件培養基的離心過濾，濃縮及凍干：將所收集的間充質干細胞條件培養基進行過濾離心，所用離心濾膜為截留分子量為3.5kDa的分子濾膜；將離心后的條件培養基通過超濾的方式進行進一步的濃縮，通過Slide-A-Lyzer等透析膜濃縮2-20倍；將最終的濃縮液放置于容器中進行最終凍干，制備成凍干粉；注意全程無菌化處理。

3.含有如權利要求1或2所述的人臍帶間充質干細胞復合細胞因子的修復材料，其特征在于，所述的修復材料包括人臍帶間充質干細胞復合細胞因子和透明質酸，每10ml修復材料中含有0.1ng-100mg人臍帶間充質干細胞復合細胞因子。

4.根據權利要求3所述的修復材料，其特征在于，所述的修復材料為膠狀修復材料、面膜修復材料或膏狀修復材料。

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