[發明專利]一種米渣蛋白的糖基化改性方法

有效

• 申請號: 201410266430.8
• 申請日: 2014-06-16
• 公開（公告）號: CN104004812A
• 公開（公告）日: 2014-08-27
• 發明（設計）人: 梁盈;林親錄;魯倩;劉穎;吳偉;楊濤;吳躍
• 申請（專利權）人: 中南林業科技大學
• 主分類號: C12P21/06
• 分類號: C12P21/06;C07K1/107
• 代理公司: 長沙正奇專利事務所有限責任公司 43113
• 代理人: 郭立中

技術領域

本發明屬疏水性植物蛋白的改性研究領域，具體涉及一種米渣蛋白的糖基化改性方法。

背景技術

稻谷是我國第一大作物糧食，總產量長居世界第一。長期以來，稻谷生產及其副產物的深加工一直備受食品科學研究者的高度關注。目前，米渣主要是用來作為動物飼料，而從米渣中提取的米渣蛋白在食品工業中應用逐漸廣泛。米渣蛋白的開發和利用研究正是基于豐富稻米加工產品和合理利用稻米加工副產品的研究和綜合利用。米渣蛋白中75%-80%是谷蛋白，其氨基酸組成與大米蛋白基本一致。谷蛋白^[5]的氨基酸組成平衡合理，其中賴氨酸含量高于其他谷類，精氨酸含量也較高，是其他植物蛋白甚至很多動物蛋白所無法比擬的。米渣蛋白是高疏水性植物蛋白的代表，由于其溶解性較差，不能在水中與其他物料形成均勻的體系，影響了米渣蛋白在溶液體系中的應用，另外其較差的溶解性也會導致其穩定性、乳化性、發泡性等性能不佳，目前其應用基本限于飼料。因此如何降低以谷蛋白為主的米渣蛋白的疏水性已成為拓展其應用價值的研究熱點。

多糖是指由一個以上單糖通過糖苷鍵連接的聚合物，除作為植物的貯藏養料和骨架成分外，有些植物體內的多糖類化合物還具有抗腫瘤、抗心血管疾病、抗衰老等生理活性。多糖是重要的高分子化合物，但因其單糖的組成種類和連接位置復雜，異頭碳的構型不同，加大了研究難度，發展比蛋白質和核酸晚。近年由于多糖類化合物的特殊生理活性，糖復合物和多糖類化合物的研究有了快速發展。

從目前所報道的文獻來看，蛋白質與還原糖通過美拉德反應進行接枝改性的方法主要有干法和濕法兩種。目前國外已被研究過的糖基化改性蛋白質多為乳清蛋白、β-乳球蛋白、牛血清蛋白、酪蛋白、溶菌酶，也有小麥面筋蛋白和大豆分離蛋白，并發現其共聚物具有優良的乳化特性。國內在這方面的工作起步較晚，對于改善疏水性植物蛋白功能領域的研究大多集中在大豆蛋白，對于增溶和功能特性改善需求更為迫切的谷物蛋白質，尤其是米渣蛋白來說，其研究則較少。江南大學研究則是用單糖對大米蛋白進行糖基化改性，且改性后其功能性質的改變也僅僅體現在溶解性、乳化性、起泡性等方面。

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發明內容

本發明旨在克服現有技術的不足，提供一種米渣蛋白的糖基化改性方法。

為了達到上述目的，本發明提供的技術方案為：

所述米渣蛋白的糖基化改性的方法包括如下步驟：

（1）用80～90℃水洗米渣，按115～125?U/g的量向米渣中加入耐高溫α-淀粉酶，在pH4～5?、80～90℃條件下酶解0.5～1.5h，降解殘留淀粉；滅酶后，按1100～1300?U/g的量向米渣中加入堿性蛋白酶，在pH?7.5～8.5、40～50℃條件下預酶解1.5～2.5h，再用質量百分比濃度為1%的?NaOH調節pH?為11～12后于40～50℃堿提1.5～2.5?h，堿提時的液固比為8～12:1，得米渣蛋白質，米渣蛋白質提取率可達到60.71%，純度達90.46%；

（2）將1g步驟（1）所得的米渣蛋白質溶于100mL蒸餾水，調節pH值為10～11，優選11，攪拌后冷卻至室溫備用；

（3）將多糖加入步驟（2）制備的米渣蛋白質溶液中，多糖與米渣蛋白質的質量比為3.5～5.5:1，優選5:1；調節pH為10～11，優選11，攪拌后干燥，優選冷凍真空干燥，即得具有優良抗氧化活性的糖基化改性后的米渣蛋白。

優選的，步驟（1）是用90℃水洗米渣，按120?U/g的量向米渣中加入耐高溫α-淀粉酶，在pH4.5?、90℃條件下酶解1h，降解殘留淀粉；滅酶后，按1200?U/g的量向米渣中加入堿性蛋白酶，在pH?8，45℃條件下預酶解2h，再用質量百分比濃度為1%的?NaOH調節pH?為12后于45℃堿提2?h，堿提時的液固比為10:1，得米渣蛋白質。

其中，所述多糖為具有調節免疫、抗腫瘤、抗心血管疾病、抗氧化等生理活性功能的多糖，如葡聚糖、南瓜多糖或香菇多糖。

本發明以具有豐富資源的米渣為原料制備得到的低敏性、高生物價、高營養價值的米渣蛋白為基礎，采用具有調節免疫、抗腫瘤、抗心血管疾病、抗衰老等生理活性的多糖為糖基供體，以美拉德反應原理為理論基礎，進行米渣蛋白-多糖的復合反應。