[發(fā)明專利]一種富集與檢測低濃度蒽醌類有效成分的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201410263538.1
• 申請日: 2014-06-13
• 公開（公告）號: CN104090036A
• 公開（公告）日: 2014-10-08
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 曹君;胡帥帥;曹婉;龐瀟卿
• 申請（專利權(quán)）人: 杭州師范大學(xué)
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/08
• 代理公司: 杭州天正專利事務(wù)所有限公司 33201
• 代理人: 黃美娟;王曉普

1.一種富集與檢測低濃度蒽醌類有效成分的方法，所述蒽醌類有效成分為蘆薈大黃素、大黃酸、大黃素、大黃酚、大黃素甲醚中的一種或兩種以上，其特征在于所述方法包括以下步驟：

(1)反應(yīng)容器中加入含有低濃度蒽醌類有效成分的待檢測樣品溶液，并加入四氧化三鐵磁性石墨烯配成混合液，使混合液中四氧化三鐵磁性石墨烯的濃度為0.0125mg/mL-0.4000mg/mL，混合液的pH值為4-8，震蕩富集1～10min后，靜置，將磁鐵置于反應(yīng)容器底部吸附固體，棄去液體，殘留固體烘干后用解吸劑進(jìn)行洗脫，所述解吸劑為甲醇、含體積分?jǐn)?shù)1％乙酸的乙醇、含體積分?jǐn)?shù)1％乙酸的乙腈、含體積分?jǐn)?shù)1％乙酸的乙酸乙酯或含體積分?jǐn)?shù)1～4％乙酸的甲醇，收集洗脫液、洗脫液干燥、所得固體用溶解劑溶解，得到富集樣液，所述溶解劑為甲醇，富集樣液離心，取上清液用液質(zhì)聯(lián)用儀檢測，得到富集樣液中蒽醌類有效成分的總離子流色譜圖和各成分的提取離子色譜圖；

(2)以蘆薈大黃素的對照品配制不同濃度的對照品溶液，按照富集樣液同樣條件用液質(zhì)聯(lián)用儀檢測，獲得蘆薈大黃素對照品的提取離子色譜圖，以蘆薈大黃素對照品溶液的提取離子色譜圖中色譜峰的峰面積為橫坐標(biāo)，以蘆薈大黃素對照品的進(jìn)樣量為縱坐標(biāo)制作蘆薈大黃素標(biāo)準(zhǔn)曲線，按同樣方法制作大黃酸標(biāo)準(zhǔn)曲線、大黃素標(biāo)準(zhǔn)曲線、大黃酚標(biāo)準(zhǔn)曲線、大黃素甲醚標(biāo)準(zhǔn)曲線；根據(jù)富集樣液的各成分的提取離子色譜圖中色譜峰的峰面積及各成分的標(biāo)準(zhǔn)曲線，計算得到富集樣液中蘆薈大黃素、大黃酸、大黃素、大黃酚、大黃素甲醚的含量，

(3)計算富集倍數(shù)：

取蘆薈大黃素對照品，配制成濃度為0.25μg/mL的蘆薈大黃素稀釋液，按照步驟(1)的相同的方法條件，加入四氧化三鐵磁性石墨烯進(jìn)行富集檢測，得到蘆薈大黃素稀釋液富集后的樣液的提取離子色譜圖，并將蘆薈大黃素稀釋液以相同條件用液質(zhì)聯(lián)用儀檢測，得到蘆薈大黃素稀釋液的提取離子色譜圖，蘆薈大黃素稀釋液富集后的樣液的提取離子色譜圖中蘆薈大黃素色譜峰的峰面積與蘆薈大黃素稀釋液的提取離子色譜圖中蘆薈大黃素色譜峰的峰面積之比，即為蘆薈大黃素的富集倍數(shù)；

按照上述方法分別計算大黃酸、大黃素、大黃酚、大黃素甲醚的富集倍數(shù)；

(4)根據(jù)蘆薈大黃素、大黃酸、大黃素、大黃酚、大黃素甲醚各自的富集倍數(shù)，富集樣液中蘆薈大黃素、大黃酸、大黃素、大黃酚、大黃素甲醚的含量除以各自的富集倍數(shù)，換算得到待檢測樣品溶液中蒽醌類有效成分的含量。

2.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述步驟(1)中，所述混合液中四氧化三鐵磁性石墨烯的濃度為0.0500mg/mL。

3.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述步驟(1)中，所述混合液中調(diào)pH值為6。

4.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述步驟(1)中，震蕩富集的時間為5min。

5.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述步驟(1)中，所述解吸劑為含體積分?jǐn)?shù)1％乙酸的甲醇。

6.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述步驟(1)中，所述解吸劑的體積用量與待檢測樣品溶液的體積比為1：100～1000。

7.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述步驟(1)中，所述解吸劑的體積用量與待檢測樣品溶液的體積比為1：400。

8.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述步驟(1)中，所述溶解劑的體積用量與待檢測樣品溶液的體積比為1：1000～8000。

9.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述步驟(1)中，所述溶解劑的體積用量與待檢測樣品溶液的體積比為1：4000。

10.如權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述步驟(1)中，所述解吸劑洗脫的次數(shù)為3次。