[發(fā)明專利]肝癌相關(guān)的亮氨酸富集不育阿爾法模體1基因甲基化位點(diǎn)及應(yīng)用

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201410262915.X
• 申請日: 2014-06-13
• 公開（公告）號: CN104250664A
• 公開（公告）日: 2014-12-31
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 楊小麗;何敏;劉坤;張成東;張悅寧
• 申請（專利權(quán)）人: 楊小麗
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;C12N15/11
• 代理公司: 廣西南寧明智專利商標(biāo)代理有限責(zé)任公司 45106
• 代理人: 黎明天

1.肝癌相關(guān)的亮氨酸富集不育阿爾法模體1?(?leucine?rich?repeat?and?sterile?alpha?motif?containing?1,?LRSAM1)??基因甲基化位點(diǎn)，其特征在于：甲基化芯片篩查原發(fā)性肝細(xì)胞癌與對應(yīng)的癌旁組織中甲基化譜之間的差異，發(fā)現(xiàn)在原發(fā)性肝細(xì)胞癌的DNA中，LRSAM1基因的一個(gè)位點(diǎn)cg05840553的甲基化水平明顯低于癌旁組，差異具有顯著性，該特異性位點(diǎn)所在的核酸序列為?：GGCATGAGACACAGCCTGCCACATTAACTGCTAGGTTTACATCTACAACACAGCTGGAAACGCTCACTGGATCTTCACCCACACCCCGTTTAATCTCCCAACAACGCCATGCCCACTTCCTG?，下劃線處堿基為該甲基化位點(diǎn)?的確切位置，該位點(diǎn)距LRSAM1基因轉(zhuǎn)錄起始位點(diǎn)1157個(gè)堿基。

2.肝癌相關(guān)的LRSAM1?基因甲基化位點(diǎn)的應(yīng)用，其特征在于：焦磷酸測序法定量檢測人LRSAM1基因特異性甲基化位點(diǎn)cg05840553,特異性甲基化位點(diǎn)的引物，包括PCR引物和甲基化測序引物，其中，所述PCR上游引物序列為：5^’?-GGGAAGTTAGTAGTTGTTTAGTAGGTATG-3^，，下游引物序列為：biotin-5^，-ACTTAAAAACATTAAACAACCAACATCTA-3^，，甲基化測序引物序列為：5^，?-ATATTTATAATATAGTTGGAA-3^，；利用該引物可以準(zhǔn)確檢測人原發(fā)性肝細(xì)胞癌組織中特異性DNA位點(diǎn)的甲基化水平。

3.?如權(quán)利要求2所述肝癌相關(guān)的LRSAM1?基因甲基化位點(diǎn)的應(yīng)用，其特征在于：應(yīng)用焦磷酸測序?qū)RSAM1?基因cg05840553位點(diǎn)甲基化程度檢測中，原發(fā)性肝細(xì)胞癌與對應(yīng)的癌旁組織存在顯著性差異；cg05840553在肝癌中甲基化程度顯著降低；通過焦磷酸測序能對該特異性位點(diǎn)的甲基化進(jìn)行快速準(zhǔn)確的定量檢測，為肝癌的預(yù)防和治療提供有效的作用靶點(diǎn)。