[發明專利]一種副溶血性弧菌分子檢測方法及使用的引物對

無效

• 申請號: 201410262381.0
• 申請日: 2014-06-12
• 公開（公告）號: CN104017877A
• 公開（公告）日: 2014-09-03
• 發明（設計）人: 姚火春;慕艷娟;潘子豪
• 申請（專利權）人: 南京農業大學
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;C12Q1/04;C12N15/11;C12R1/63
• 代理公司: 南京天華專利代理有限責任公司 32218
• 代理人: 傅婷婷;徐冬濤

1.一對用于副溶血性弧菌分子檢測的特異性引物對，其特征在于上游引物toxRS-F為SEQ?ID?NO.1，下游引物toxRS-R為SEQ?ID?NO.2。

2.權利要求1所述的引物對在制備檢測副溶血性弧菌的檢測試劑中的應用。

3.一種用于副溶血性弧菌分子檢測的試劑盒，其特征在于包含權利要求1所述的特異性引物對。

4.根據權利要求3所述的試劑盒，其特征在于還包含Taq?PCR?Master?Mix。

5.權利要求1所述的引物對在檢測副溶血性弧菌中的應用。

6.一種副溶血性弧菌分子檢測方法，其特征在于使用權利要求1所述的特異性引物PCR擴增待檢樣品的DNA，如果能夠擴增得到679bp的片段，則說明待檢樣品中含有副溶血性弧菌。

7.根據權利要求6所述的分子檢測方法，其特征在于所述PCR擴增的反應體系為25μl：2×Taq?PCR?Master?Mix12.5μl，dd?H₂O9.5μl，上游、下游引物各1μl，DNA模板1μl；反應程序為：94℃預變性5min，94℃變性30s，59℃退火30s，72℃延伸45s，共30個循環，最后72℃延伸10min。