[發(fā)明專利]LPNISKP修飾的吲哚喹嗪，其制備，納米結(jié)構(gòu)，活性和應(yīng)用

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201410261699.7
• 申請日: 2014-06-11
• 公開（公告）號: CN105218637A
• 公開（公告）日: 2016-01-06
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 彭師奇;趙明;王玉記;吳建輝;周倩羽
• 申請（專利權(quán)）人: 首都醫(yī)科大學(xué)
• 主分類號: C07K7/06
• 分類號: C07K7/06;C07K1/02;B82Y30/00;A61K38/08;A61P35/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及(6S)-3-乙酰基-4-氧代-4，6，7，12-四氫吲哚[2，3-a]喹嗪-6-甲酰-Leu-Pro-Asn-Ile-Ser-Lys-Pro。涉及它的制備方法，涉及它的納米結(jié)構(gòu)，涉及它的體內(nèi)外抗腫瘤作用，涉及它抗腫瘤細(xì)胞粘附侵襲和遷移的作用。因而本發(fā)明涉及它在制備抗腫瘤藥物，制備抗腫瘤細(xì)胞粘附侵襲和遷移藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥領(lǐng)域。

技術(shù)背景

惡性腫瘤嚴(yán)重威脅人類的健康。除了自身對腫瘤患者的預(yù)后惡劣之外，惡性腫瘤并發(fā)的炎癥、血栓和轉(zhuǎn)移進一步惡化患者的預(yù)后。例如，超過90％以上的惡性腫瘤患者都是死于腫瘤轉(zhuǎn)移。腫瘤轉(zhuǎn)移依賴于4個因素：1)腫瘤細(xì)胞表面形成微血栓，逃避巨噬細(xì)胞吞噬，通過血液循環(huán)遷移到遠(yuǎn)端；2)遷移到遠(yuǎn)端的腫瘤細(xì)胞粘附到血管壁；3)細(xì)胞粘附到血管壁的腫瘤細(xì)胞通過侵襲出血管而進入正常組織。

由于現(xiàn)有抗腫瘤藥物不具備抗轉(zhuǎn)移作用，所以療效不理想。發(fā)明同時具有抗腫瘤、抗炎癥、抗血栓和抗腫瘤轉(zhuǎn)移作用的藥物是臨床的迫切需求。

RGD四肽，即RGDS，RGDF和RGDV是整合素α_Vβ₃的阻斷劑，具有抗血栓和抗細(xì)胞粘附活性。Leu-Pro-Asn-Ile-Ser-Lys-Pro則具備抗腫瘤細(xì)胞遷移作用。申請人曾經(jīng)把RGD四肽與雌激素偶聯(lián)，制備沒有凝血副作用的抗骨質(zhì)疏松劑。申請人曾經(jīng)把RGD四肽與四氫-β-咔啉-3-羧酸偶聯(lián)制備高效的抗血栓劑。申請人也曾經(jīng)用氨基酸修飾四氫-β-咔啉-3-羧酸、β-咔啉-3-羧酸及1-位取代的β-咔啉-3-羧酸，包括1-位取代的四氫-β-咔啉-3-羧酸或1-位取代的β-咔啉-3-羧酸制備高效的抗血栓劑或抗腫瘤劑。下面是發(fā)明人創(chuàng)造的結(jié)構(gòu)類型的代表。盡管發(fā)明人付出了大量研究精力，篩選了數(shù)百種化合物，一直沒有得到同時具有抗腫瘤和抗腫瘤轉(zhuǎn)移作用的化合物。

發(fā)明人在分析數(shù)百種化合物的結(jié)構(gòu)及活性變化的基礎(chǔ)上，認(rèn)識到將Leu-Pro-Asn-Ile-Ser-Lys-Pro與(6S)-3-乙酰基-4-氧代-4，6，7，12-四氫吲哚[2，3-a]喹嗪-6-羧酸偶聯(lián)，形成的化合物會同時具有抗腫瘤和抗腫瘤轉(zhuǎn)移作用。基于這個認(rèn)識，發(fā)明人提出了本發(fā)明。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的第一個內(nèi)容是提供下面結(jié)構(gòu)的(6S)-3-乙酰基-4-氧代-4，6，7，12-四氫吲哚[2，3-a]喹嗪-6-甲酰-Leu-Pro-Asn-Ile-Ser-Lys-Pro。

本發(fā)明的第二個內(nèi)容是提供(6S)-3-乙酰基-4-氧代-4，6，7，12-四氫吲哚[2，3-a]喹嗪-6-甲酰-Leu-Pro-Asn-Ile-Ser-Lys-Pro的制備方法，該方法包括：

(1)在多聚磷酸的存在下，L-色氨酸和苯甲醇反應(yīng)，生成L-色氨酸芐酯；

(2)在三氟乙酸的存在下，在二氯甲烷中1，1，3，3-四甲氧基丙烷和L-色氨酸芐酯縮合為(3S)-1-(2，2-二甲氧乙基)-2，3，4，9-四氫-β-咔啉-3-羧酸芐酯；

(3)在三乙胺的存在下，在丙酮中雙乙烯酮和(3S)-1-(2，2-二甲氧乙基)-2，3，4，9-四氫-β-咔啉-3-羧酸芐酯縮合為(3S)-1-(2，2-二甲氧乙基)-2-乙酰乙酰基-2，3，4，9-四氫-β-咔啉-3-羧酸芐酯；

(4)在鹽酸水溶液(2M)的存在下，在丙酮中(3S)-1-(2，2-二甲氧乙基)-2-乙酰乙酰基-2，3，4，9-四氫-β-咔啉-3-羧酸芐酯氧化環(huán)合為(6S)-苯基-3-乙酰基-4-氧代-4，6，7，12-四氫吲哚[2，3-a]喹嗪-6-羧酸酯；

(5)冰浴下在NaOH的水溶液(2M)和甲醇中，(6S)-苯基-3-乙酰基-4-氧代-4，6，7，12-四氫吲哚[2，3-a]喹嗪-6-羧酸酯轉(zhuǎn)化為(6S)-3-乙酰基-4-氧代-4，6，7，12-四氫吲哚[2，3-a]喹嗪-6-羧酸；

(6)采用逐步縮合法，在N，N-二環(huán)己基碳二亞胺和N-羥基苯駢三氮唑的存在下，在干燥四氫呋喃中反應(yīng)，得到全保護多肽序列Boc-Leu-Pro-Asn-Ile-Ser-Lys(Fmoc)-Pro-OBzl；

(7)冰浴下在氯化氫的乙酸乙酯溶液(4M)中，全保護多肽序列Boc-Leu-Pro-Asn-Ile-Ser-Lys(Fmoc)-Pro-OBzl脫除Boc得Leu-Pro-Asn-Ile-Ser-Lys(Fmoc)-Pro-OBzl；