[發(fā)明專利]一種利用SNP提高白樺細胞中總三萜和齊墩果酸含量的方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201410260611.X | 申請日： | 2014-06-12 |
| 公開（公告）號： | CN104031970B | 公開（公告）日： | 2017-01-25 |
| 發(fā)明（設計）人： | 詹亞光;曾凡鎖;辛穎;劉堃;齊鳳慧;范桂枝;尹靜;由香玲 | 申請（專利權）人： | 東北林業(yè)大學;詹亞光;曾凡鎖 |
| 主分類號： | C12P33/00 | 分類號： | C12P33/00 |
| 代理公司： | 暫無信息 | 代理人： | 暫無信息 |
| 地址： | 150040 黑龍*** | 國省代碼： | 黑龍江;23 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 利用 snp 提高 白樺 細胞 中總三萜 果酸 含量 方法 | ||
1.本專利提出NO促進白樺三萜合成技術為：以白樺花藥懸浮細胞為實驗材料，按50g/L接種量接種于100mL?B5液體培養(yǎng)基中，培養(yǎng)條件為：120rpm，25℃，光照強度2000lx，光周期16h，濕度40％～50％，培養(yǎng)周期為10d。培養(yǎng)基成分為B5基本培養(yǎng)基，附加激素及濃度為0.1～0.3mg/L6-BA和0.5～4.0mg/L?TDZ，蔗糖20g/L，酸水解酪蛋白1g/L，pH5.5～6.0，121℃高溫高壓滅菌20min。在細胞懸浮培養(yǎng)第8天加入SNP使其終濃度為1mmol/L，培養(yǎng)12h后收獲，齊墩果酸含量最高為1.3089mg/gDW，是對照組的569％。培養(yǎng)48h收獲，細胞內(nèi)總三萜含量達到23.86mg/gDW，為對照組的143.20％。
2.根據(jù)權利要求書1所述的方法，其中的液體培養(yǎng)基為為B5基本培養(yǎng)基，附加激素及濃度為0.1～0.3mg/L6-BA和0.5～4.0mg/L?TDZ，蔗糖20g/L，酸水解酪蛋白1g/L。
3.根據(jù)權利要求書1所述的方法，其中的白樺花藥細胞接種量為5g鮮細胞含100ml培養(yǎng)液的250ml三角瓶中，搖床轉速120r/min。
4.根據(jù)權利要求書1所述的方法，其中SNP溶液通過0.22um無菌膜過濾除菌，在懸浮培養(yǎng)第八天加入，培養(yǎng)周期為10天，且SNP的終濃度為1mmol/L。
5.根據(jù)權利要求書1所述的方法，其中的收獲時間為SNP添加12-24h后收獲懸浮細胞。
6.根據(jù)權利要求書1所述的方法，其中SNP處理后齊墩果酸含量最高為1.3089mg/gDW，是對照組的569％。細胞內(nèi)總三萜含量達到23.86mg/gDW，為對照組的143.20％。
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