[發(fā)明專利]單個金納米顆粒表面等離子共振探針及其制備方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201410259872.X
• 申請日: 2014-06-12
• 公開（公告）號: CN104032006A
• 公開（公告）日: 2014-09-10
• 發(fā)明（設計）人: 張磊;汪聯輝;胡艷玲;黃維;李亞欣
• 申請（專利權）人: 南京郵電大學
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;C12N15/11;C12N15/10
• 代理公司: 南京經緯專利商標代理有限公司 32200
• 代理人: 王月霞;唐循文

1.單個金納米顆粒表面等離子共振探針，其特征在于：該探針是將球形金納米顆粒固定在預處理過的玻璃表面，識別單鏈DNA通過功能基團連接到球形金納米顆粒表面，所述識別單鏈DNA為發(fā)夾形結構。

2.根據權利要求1所述的單個金納米顆粒表面等離子共振探針，其特征在于：所述識別單鏈DNA的序列為：5’-TGA?CT?-X-?AGT?CAT?TTT?TTT?TTT-(CH₂)₆-SH-3’，其中X部分序列為T?CAA?CAT?CAG?TCT?GAT?AAG?CTA，C?AGA?CTC?CGG?TGG?AAT?GAA?GGA或者C?TAG?TGG?TCC?TAA?ACA?TTT?CAC。

3.根據權利要求1所述的單個金納米顆粒表面等離子共振探針，其特征在于：所述球形金納米顆粒的粒徑直徑在40~90?nm之間，散射光譜峰位于540~600?nm。

4.權利要求1、2或3所述的單個金納米顆粒表面等離子共振探針的制備方法，其特征在于包括以下步驟：

1）金種子溶液的制備：將2~8?mL?40?mM檸檬酸鈉溶液加入到沸騰的40~60?mL?0.01%wt?HAuCl₄溶液中，加熱煮沸5~30?min；

2）球形金納米顆粒的生長：在燒杯中加入10~30?mL水、0.5~5?mL步驟1）制備的金種子溶液和0.1~5?mL?0.2?M鹽酸羥胺溶液，以0.06?mL/min的速度加入1~10?mL?0.1%?HAuCl₄溶液，得到金納米溶液；

3）金納米顆粒玻璃基底的制備：將ITO玻璃依次浸入洗潔精溶液、丙酮、無水乙醇、超純水中超聲清洗0.5~5?h，取出后用N₂吹干備用；取步驟2）中的金納米溶液0.2~2?mL，按比例1:1?~?1:50稀釋后，放入ITO玻璃片，浸泡0.5~20?min后用超純水沖洗并用N₂吹干；

4）發(fā)夾形DNA分子的修飾：將步驟3）中制備的金納米顆粒玻璃基底浸泡在1?μM的識別單鏈DNA溶液中，經搖床20~30℃搖勻5~20?h，取出玻璃基底用超純水沖洗并用N₂吹干，得到單個金納米顆粒表面等離子共振探針。

5.?權利要求1-3中任意一項所述的單個金納米顆粒表面等離子共振探針在動態(tài)檢測肺癌標志物中的應用。