[發明專利]一種貴州半蒴苣苔的組織培養快速繁殖方法有效
| 申請號： | 201410251602.4 | 申請日： | 2014-06-09 |
| 公開（公告）號： | CN104041412A | 公開（公告）日： | 2014-09-17 |
| 發明（設計）人： | 李翠;張占江;韋坤華;李林軒;韋瑩;王一諾;王曉峰 | 申請（專利權）人： | 廣西壯族自治區藥用植物園 |
| 主分類號： | A01H4/00 | 分類號： | A01H4/00 |
| 代理公司： | 廣西南寧明智專利商標代理有限責任公司 45106 | 代理人： | 黎明天 |
| 地址： | 530023 廣西*** | 國省代碼： | 廣西;45 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 貴州 半蒴苣苔 組織培養 快速 繁殖 方法 | ||
1.一種貴州半蒴苣苔組織培養快速繁殖方法，其特征在于該方法包括以下步驟：
（1）外植體的選擇與消毒：取貴州半蒴苣苔頂芽作為外植體，依次用2%洗潔精水溶液浸泡5-10min、線狀自來水沖洗10-20min、添加2-3滴吐溫-20的100?ml0.1%升汞消毒7-9min、無菌水沖洗3-5次，最后用滅菌濾紙吸去表面水分，剪成長約1cm長的外植體；
（2）頂芽分化獲得叢生芽培養：將步驟（1）得到的外植體接種到MS培養基中，在培養溫度為23-26℃、光照強度1500lux、光照時間為10-12小時/天的條件下培養25-30天，頂芽分化后獲得叢生芽，其中MS培養基中含0.5-1.5mg/L的6-BA、0.5-1.0mg/L的NAA、25-30g/L蔗糖和4.0-4.5g/L的瓊脂，培養基的pH值為5.8；
（3）叢生芽壯苗繼代培養：將步驟（2）中得到的試管苗不定芽置于MS增殖培養基中，在培養溫度23-26℃、光照強度1500lux、光照時間為10-12小時/天的條件下培養20-25天得到完整的健壯植株，其中MS壯苗培養基中含1.0-2.0mg/L的6-BA、0.5-1.0mg/L的NAA、0.5-1.0mg/L?KT,25-30g/L蔗糖和4.0-4.5g/L的瓊脂，培養基的pH值為5.8；
（4）叢生芽生根培養：將步驟（3）中得到的健壯植株置于MS生根培養基中，在培養溫度23-26℃、光照強度1500lux、光照時間為10-12小時/天的條件下培養25-30天得到帶根的完整植株，其中MS生根培養基中含1.0-1.5mg/L的IAA、0.5?mg/L的ABT、25-30g/L蔗糖和4.0-4.5g/L的瓊脂，培養基的pH值為5.8；
（5）煉苗與移栽：步驟（4）獲得帶根的完整植株后，在室溫為25℃的室內散射光照射2-4天，打開瓶蓋，在瓶中加入少量自來水，煉苗2-4天，表面角質形成后將苗取出，洗凈根部培養基，立即移栽到通風良好且弱光石灰巖土壤中，在石灰巖土壤中生長一個半月后移栽大田。
2.如權利要求1所述的貴州半蒴苣苔組織培養快速繁殖方法，其特征在于：所述無菌水為經高壓滅菌的蒸餾水。
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