[發(fā)明專利]一種利用柳枝稷幼穗進(jìn)行無性繁殖的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201410249960.1
• 申請日: 2014-06-06
• 公開（公告）號: CN104067934B
• 公開（公告）日: 2018-11-09
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 奚亞軍;王勇鋒;李毛
• 申請（專利權(quán)）人: 西北農(nóng)林科技大學(xué)
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 西安睿通知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(特殊普通合伙) 61218
• 代理人: 惠文軒

1.一種利用柳枝稷幼穗進(jìn)行無性繁殖的方法，其特征在于，包括以下操作：

1)待柳枝稷生長發(fā)育至第4個節(jié)完全露出、幼穗已形成時，從靠近地面處將柳枝稷分蘗剪下，從下向上剝?nèi)チ︷⒎痔Y上的葉片至節(jié)間長度小于1cm時停止，距該節(jié)間上端莖節(jié)上下各1.2～1.5cm切下，獲得包含幼穗的外植體；所述的外植體中包含有2cm長度的幼穗，具有正常花原基組織；

2)將外植體消毒并用無菌水漂洗；

3)無菌環(huán)境下，將外植體兩端各切去0.2～0.5cm，將外植體縱向切為兩半，切口向下接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基上；接種后置于恒溫光照培養(yǎng)箱中，培養(yǎng)30～40天至穗芽形成；

所述的誘導(dǎo)培養(yǎng)基是以MS為基礎(chǔ)培養(yǎng)基，并添加6-BA、瓊脂粉和蔗糖；所述的誘導(dǎo)培養(yǎng)基的成分為：MS基礎(chǔ)培養(yǎng)基4.43g/L，3mmol/L的6-BA、7.5g/L的瓊脂粉和30g/L的蔗糖；

4)將形成的穗芽沿基部2～3mm處切除，并再次接種到誘導(dǎo)培養(yǎng)基上，待新生芽生長至1.2～1.5cm，重復(fù)繼代培養(yǎng)3～4次，獲得擴(kuò)繁后的穗芽；

5)在不損害生長點(diǎn)的情況下，將穗芽從基部自芽塊上拆分下來，將穗芽單獨(dú)直接扦插到培養(yǎng)基質(zhì)中，培養(yǎng)7天后，待單獨(dú)的穗芽生根并發(fā)育成獨(dú)立的幼苗，將幼苗連同培養(yǎng)基質(zhì)栽植于溫室或大田。

2.如權(quán)利要求1所述的利用柳枝稷幼穗進(jìn)行無性繁殖的方法，其特征在于，所述的外植體的消毒處理為：先用體積分?jǐn)?shù)為70％的酒精消毒1～2min，然后用體積分?jǐn)?shù)5～8％的次氯酸鈉溶液消毒2～3min；

消毒完成后并用滅菌水漂洗3次。

3.如權(quán)利要求1所述的利用柳枝稷幼穗進(jìn)行無性繁殖的方法，其特征在于，所述在恒溫光照培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)時，其培養(yǎng)溫度為20～25℃、每天光照20h、黑夜4h。

4.如權(quán)利要求1所述的利用柳枝稷幼穗進(jìn)行無性繁殖的方法，其特征在于，在進(jìn)行繼代培養(yǎng)時，采用上次培養(yǎng)的新生芽進(jìn)行接種，接種時新生芽的長度為1.0cm。

5.如權(quán)利要求1所述的利用柳枝稷幼穗進(jìn)行無性繁殖的方法，其特征在于，以體積比計，所述的培養(yǎng)基質(zhì)的組份為栽培土：腐葉土：河沙＝1：3：1，栽植前一天在基質(zhì)中加水，直到吸水飽和。

6.如權(quán)利要求1所述的利用柳枝稷幼穗進(jìn)行無性繁殖的方法，其特征在于，所述的幼苗為相同基因型的幼苗。