[發(fā)明專利]一種酶解制備鎖陽多糖的方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201410244149.4
• 申請日: 2014-06-04
• 公開（公告）號: CN104004108A
• 公開（公告）日: 2014-08-27
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 陳貴林;樊海燕;于春洋
• 申請（專利權(quán)）人: 內(nèi)蒙古大學(xué)
• 主分類號: C08B37/00
• 分類號: C08B37/00
• 代理公司: 北京紀(jì)凱知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11245
• 代理人: 關(guān)暢;陳曉慶

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種鎖陽多糖的制備方法；特別涉及一種酶解制備鎖陽多糖的方法，屬于中藥制備領(lǐng)域。

背景技術(shù)

鎖陽是一種根寄生肉質(zhì)草本種子植物，俗稱不老藥，其干燥肉質(zhì)莖可作為傳統(tǒng)中醫(yī)、蒙醫(yī)、維吾爾醫(yī)藥材。中華人民共和國藥典2010年版一部記載，鎖陽用作補(bǔ)腎陽，益精血，潤腸通便，主治腎陽不足，精血虧虛，腰膝痿軟，陽痿滑精，腸燥便秘。近代研究發(fā)現(xiàn)鎖陽水提液具有抗氧化、抗缺氧、抗癲癇、提高免疫、延緩衰老、增強(qiáng)耐力、延長抗應(yīng)激存活時間等方面的重要醫(yī)療價值。

多糖是許多中草藥的重要成分，在傳統(tǒng)熱水煎服途徑，水煎液中必然含有大量的多糖類組分。近年研究表明鎖陽多糖具有多種生物活性，包括抗氧化、增強(qiáng)免疫、抗衰老、抗疲勞、抗急性胃潰瘍、促進(jìn)小腸推進(jìn)功能等，具備了鎖陽水提液大部分重要的生物活性。因此，提高鎖陽多糖的提取率，對充分利用鎖陽資源、開發(fā)鎖陽多糖產(chǎn)品很有價值。

鎖陽多糖的提取制備方法一般采用水提醇沉法，按照料液比、提取時間、提取次數(shù)三個因素的最佳工藝條件進(jìn)行提取制備，經(jīng)減壓烘干后所得鎖陽多糖樣品溶于蒸餾水中，經(jīng)苯酚-硫酸法測定其中所含多糖質(zhì)量，并計算出鎖陽(產(chǎn)地：甘肅張掖市)多糖得率為43.46mg/g；不同產(chǎn)地的鎖陽，其多糖得率也有差別，經(jīng)測量甘肅地區(qū)不同產(chǎn)地鎖陽多糖得率為37.05mg/g-68.50mg/g(羅光宏等，2011，甘肅河西沙區(qū)鎖陽多糖提取工藝優(yōu)化及含量測定，食品科學(xué)，32(10):79-83。)近年已公布的相關(guān)專利中鎖陽多糖提取率較高的方法為：采用酶輔助提取法，相對于傳統(tǒng)方法可使鎖陽多糖提取率提高10-65％，鎖陽多糖含量提高5-40％。(甘肅凱源生物技術(shù)開發(fā)中心，2013，酶處理提取鎖陽多糖的方法及鎖陽多糖抗腫瘤制劑的制備，CN103145863A。)

鎖陽是全寄生植物，采收后干燥肉質(zhì)莖全部入藥，味微苦澀。市售鎖陽多糖多為棕色或棕紅色粉末，含有大量鞣質(zhì)花青素類成分，其顏色嚴(yán)重影響鎖陽多糖劑型的應(yīng)用，需要發(fā)明一種多糖提取率高、多糖得率也高，并具有脫色效果好、利于多種劑型應(yīng)用的鎖陽多糖制備方法。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種酶解制備鎖陽多糖的方法，本發(fā)明提供的制備方法有效提高了鎖陽多糖提取率和得率，分別比傳統(tǒng)方法提高了114％-242％和95％-273％；并通過胃蛋白酶酶解作用，分解了部分細(xì)胞間蛋白質(zhì)，大大改善了鎖陽多糖的溶出和提取，制備的鎖陽多糖純度高，顏色淺，水溶性好，可用于直接制備鎖陽多糖制劑，或用于高品質(zhì)鎖陽多糖藥品保健品的原料。

本發(fā)明提供一種制備鎖陽多糖的方法，包括如下步驟：在脫脂的鎖陽粉末中加入占脫脂的鎖陽粉末質(zhì)量百分含量0.5％-3％的胃蛋白酶，得混合粉末；在混合粉末中加入鹽酸水溶液，酶解，得酶解液；將酶解液微沸回流，使酶解液中的胃蛋白酶失活，冷卻，離心得上清液；將上清液用Sevage法脫除蛋白，棄去下層有機(jī)相，得上層水溶液；將上層水溶液加入無水乙醇醇沉，即得所述的鎖陽多糖。

上述方法中，所述脫脂的鎖陽粉末按照如下方法制備：將鎖陽的肉質(zhì)莖自然干燥，粉碎，過篩，得粉末；將粉末脫脂干燥，得脫脂的鎖陽粉末。

上述方法中，所述篩為30目-80目篩，具體為30目篩。

上述任一所述的方法中，所述脫脂干燥的步驟如下：采用脫脂有機(jī)溶劑按(5ml-20ml)：1g的比例加入所述粉末，浸泡，抽濾，得濾餅，并將濾餅重復(fù)上述操作，將濾餅烘干；

所述脫脂有機(jī)溶劑具體按10ml：1g的比例加入所述粉末；

所述脫脂有機(jī)溶劑按照如下方法制備：將二氯甲烷和甲醇按照體積比(1-3):1混勻；

所述二氯甲烷和甲醇的體積比具體為2:1；

所述浸泡的時間為4-24小時，具體為12小時；

所述重復(fù)的次數(shù)為2-4次，具體為3次。

上述任一所述的方法中，所述胃蛋白酶占所述脫脂的鎖陽粉末質(zhì)量百分含量為1％-3％。

上述任一所述的方法中，所述混合粉末與所述鹽酸水溶液的比例為1g：(40ml-140ml)；

所述鹽酸水溶液的pH為1.3-2.0，具體為1.3-1.5；

所述酶解的溫度為30℃-45℃；

所述酶解的時間為3h-7h，具體為4h-7h；

所述回流的時間為0.5h-2h，具體為1h-2h。

上述任一所述的方法中，所述胃蛋白酶占所述脫脂的鎖陽粉末質(zhì)量百分含量為2％；

所述混合粉末與所述鹽酸水溶液的比例為1g：80ml；

所述鹽酸水溶液的pH為1.5；