[發明專利]一種酶解制備鎖陽多糖的方法

有效

• 申請號: 201410244149.4
• 申請日: 2014-06-04
• 公開（公告）號: CN104004108A
• 公開（公告）日: 2014-08-27
• 發明（設計）人: 陳貴林;樊海燕;于春洋
• 申請（專利權）人: 內蒙古大學
• 主分類號: C08B37/00
• 分類號: C08B37/00
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 關暢;陳曉慶

1.一種制備鎖陽多糖的方法，包括如下步驟：在脫脂的鎖陽粉末中加入占脫脂的鎖陽粉末質量百分含量0.5％-3％的胃蛋白酶，得混合粉末；在混合粉末中加入鹽酸水溶液，酶解，得酶解液；將酶解液微沸回流，使酶解液中的胃蛋白酶失活，冷卻，離心得上清液；將上清液用Sevage法脫除蛋白，棄去下層有機相，得上層水溶液；將上層水溶液加入無水乙醇醇沉，即得所述的鎖陽多糖。

2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于：所述脫脂的鎖陽粉末按照如下方法制備：將鎖陽的肉質莖自然干燥，粉碎，過篩，得粉末；將粉末脫脂干燥，得脫脂的鎖陽粉末。

3.根據權利要求2所述的方法，其特征在于：所述篩為30目-80目篩，具體為30目篩。

4.根據權利要求2或3所述的方法，其特征在于：所述脫脂干燥的步驟如下：采用脫脂有機溶劑按(5ml-20ml)：1g的比例加入所述粉末，浸泡，抽濾，得濾餅，并將濾餅重復上述操作，將濾餅烘干；

所述脫脂有機溶劑具體按10ml：1g的比例加入所述粉末；

所述脫脂有機溶劑按照如下方法制備：將二氯甲烷和甲醇按照體積比(1-3):1混勻；

所述二氯甲烷和甲醇的體積比具體為2:1；

所述浸泡的時間為4-24小時，具體為12小時；

所述重復的次數為2-4次，具體為3次。

5.根據權利要求1-4任一所述的方法，其特征在于：所述胃蛋白酶占所述脫脂的鎖陽粉末質量百分含量為1％-3％。

6.根據權利要求1-5任一所述的方法，其特征在于：所述混合粉末與所述鹽酸水溶液的比例為1g：(40ml-140ml)；

所述鹽酸水溶液的pH為1.3-2.0，具體為1.3-1.5；

所述酶解的溫度為30℃-45℃；

所述酶解的時間為3h-7h，具體為4h-7h；

所述回流的時間為0.5h-2h，具體為1h-2h。

7.根據權利要求1-6任一所述的方法，其特征在于：所述胃蛋白酶占所述脫脂的鎖陽粉末質量百分含量為2％；

所述混合粉末與所述鹽酸水溶液的比例為1g：80ml；

所述鹽酸水溶液的pH為1.5；

所述酶解的溫度為40℃；

所述酶解的時間為5h；

所述回流的時間為1h。

8.根據權利要求1-7任一所述的方法，其特征在于：所述離心的條件為3000-10000r/min，10-30min，2-25℃，具體為5000r/min，20min，4℃。

9.根據權利要求1-8任一所述的方法，其特征在于：所述用Sevage法脫除蛋白的次數為2-4次，具體為3次；

所述Sevage法中氯仿:正丁醇體積比為4:1；

所述上層水溶液加入無水乙醇醇沉之前還包括如下步驟：將上層水溶液減壓旋轉蒸發濃縮，得濃縮液；

所述無水乙醇醇沉時濃縮液與無水乙醇的體積比為1:4；

所述醇沉的條件為4℃靜置過夜，離心，得沉淀；

所述醇沉之后還包括如下步驟：用無水乙醇洗滌沉淀，離心得沉淀，將其冷凍干燥，即得所述的鎖陽多糖；

所述離心的條件為3000-10000r/min，10-30min，2-25℃，具體為5000r/min，20min，4℃。

10.權利要求1-9任一所述的方法在制備鎖陽多糖中的應用。