[發(fā)明專利]一種磷脂酰絲氨酸的制備方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201410234887.0
• 申請日: 2014-05-30
• 公開（公告）號: CN104059949B
• 公開（公告）日: 2017-02-15
• 發(fā)明（設計）人: 杜陽吉;梁麗敏;劉春鳳
• 申請（專利權）人: 廣東省食品工業(yè)研究所
• 主分類號: C12P13/06
• 分類號: C12P13/06
• 代理公司: 廣州知友專利商標代理有限公司44104
• 代理人: 李海波

技術領域

本發(fā)明屬于磷脂技術領域，具體涉及一種磷脂酰絲氨酸的制備方法。

背景技術

磷脂酰絲氨酸（phosphatidylserine，PS）又稱絲氨酸磷脂，二酰甘油酰磷酸絲氨酸，簡稱PS，是一類普遍存在的磷脂，通常位于細胞膜的內(nèi)層，磷酯化合物中的磷酸甘油酯類，是細胞膜組分之一，與一系列的膜功能有關。尤其在人體的神經(jīng)系統(tǒng)，是大腦的細胞膜的重要組成成分之一，同時對大腦的各種功能（尤其是對大腦的記憶力和情緒的穩(wěn)定）起到重要的調(diào)節(jié)作用，如它能影響著細胞膜的流動性、通透性，并且能激活多種酶類的代謝和合成?，F(xiàn)有的合成方法有化學合成法和生物酶法合成法，且以后者居多?；瘜W合成法副反應多，反應復雜，副產(chǎn)物復雜，分離難度非常大，如CN103351403專利文獻所公開的方法。生物酶法具有較大優(yōu)勢且研究較多，如US5965413，US6492146，US7049107，US5700668，US6878532等專利文獻，但是已公開的酶法合成方法都是以較高純度的磷脂酰膽堿為原料合成磷脂酰絲氨酸的（如磷脂酰膽堿含量50%以上的優(yōu)質(zhì)磷脂），產(chǎn)物甚至以鈣鹽的形式存在，再生步驟較為繁瑣，生產(chǎn)成本較高。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種工藝簡單，成本較低，能耗較低，易于實現(xiàn)工業(yè)化生產(chǎn)的利用粗大豆卵磷脂通過酶法制備磷脂酰絲氨酸的方法。

本發(fā)明的上述目的是通過采取如下技術手段來實現(xiàn)的：

一種磷脂酰絲氨酸的制備方法，其特征在于，以粗大豆卵磷脂為原料，加入水飽和的乙酸丁酯攪拌回流降解，減壓蒸干乙酸丁酯，濃縮物加入甲醇回流溶解，甲醇層減壓回收甲醇得到甲醇可溶物，將甲醇可溶物與有機溶劑配置溶液，再將有機相與含酶水溶液配置水相，混合有機相和水相進行反應，反應完畢分離出有機相，用水洗滌有機相，真空脫去有機溶劑，濃縮物用無水乙醇溶解攪拌，分離出無水乙醇不溶物，真空干燥得到磷脂酰絲氨酸產(chǎn)品。

本發(fā)明所述粗大豆卵磷脂原料為磷脂酰膽堿含量大于或者等于10%的粗大豆卵磷脂。

本發(fā)明所述粗大豆卵磷脂原料與原料回流降解時所用的水飽和的乙酸丁酯的重量體積比為1:1-1:0.5，降解的溫度為120-127℃，降解的時間為40-48小時。

本發(fā)明所述減壓蒸干乙酸丁酯后的濃縮物與加入的甲醇的重量體積比為1:6-1:10。

本發(fā)明所述有機溶劑為二氯甲烷或者環(huán)己烷，甲醇可溶物與有機溶劑的重量體積比為1:5-1:8。

本發(fā)明所述有機相與含酶水溶液的體積比為8:1-12:1，所述含酶水溶液中，L-絲氨酸的濃度為0.15-0.2g/ml，磷脂酶D的酶活為4-5U/ml， pH調(diào)節(jié)為6.3-6.5。

本發(fā)明所述有機相和水相的反應溫度為30-35℃，反應時間為35-40小時。

本發(fā)明所述洗滌有機相的水與有機相的體積比為1:1-2:1。

本發(fā)明所述真空脫去有機溶劑后的濃縮物用無水乙醇溶解攪拌的溫度為25-30℃，時間為2-5小時，濃縮物與無水乙醇重量體積比為1:7-1:10。

本發(fā)明所述磷脂酰絲氨酸產(chǎn)品中，磷脂酰絲氨酸的含量大于40%。

與現(xiàn)有技術相比，本發(fā)明具有如下有益效果：

（1）本發(fā)明所用的原料為粗大豆卵磷脂，因磷脂酰膽堿含量較低而價格低廉；

（2）本發(fā)明整體工藝簡單，易于實現(xiàn)工業(yè)化，制得的磷脂酰絲氨酸含量40%以上，純度較高，對我國磷脂工業(yè)，保健食品以及藥品工業(yè)都將具有重要意義。

具體實施方式

以下實施例僅用于闡述本發(fā)明，而本發(fā)明的保護范圍并非僅僅局限于以下實施例。所述技術領域的普通技術人員依據(jù)以上本發(fā)明公開的內(nèi)容和各參數(shù)所取范圍，均可實現(xiàn)本發(fā)明的目的。

實施例1

100g粗大豆卵磷脂原料（磷脂酰膽堿含量為10%），加入50ml水飽和的乙酸丁酯120℃攪拌回流降解40小時，減壓蒸干乙酸丁酯，濃縮物加入600ml甲醇回流溶解，甲醇層減壓回收甲醇得到甲醇可溶物55克。加入275ml二氯甲烷溶解甲醇可溶物，再配置含酶水溶液34.5ml，其中酶液中L-絲氨酸的濃度為0.15g/ml，酶液中磷脂酶D的酶活為4U/ml，調(diào)節(jié)pH為6.3?；旌嫌袡C相和水相，于30℃反應40小時。反應完畢分離出有機相，用275ml水洗滌有機相，真空脫去有機溶劑得到60克濃縮物，濃縮物用420ml無水乙醇25℃溶解攪拌2小時，分離出無水乙醇不溶物，真空干燥得到磷脂酰絲氨酸含量為41%的產(chǎn)品9g。

實施例2