[發(fā)明專利]一種冬小包腳菇的菌種培養(yǎng)基及其制備方法及利用其的菌種培養(yǎng)方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201410234837.2
• 申請(qǐng)日: 2014-05-29
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN103980027A
• 公開(kāi)（公告）日: 2014-08-13
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 潘高潮;夏榮盛;鄒方倫;龍漢武;陳宵
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 貴州省山地資源研究所
• 主分類號(hào): C05G1/00
• 分類號(hào): C05G1/00;A01G1/04
• 代理公司: 北京眾合誠(chéng)成知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11246
• 代理人: 龔燮英

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及農(nóng)業(yè)生物技術(shù)領(lǐng)域，尤其是涉及一種冬小包腳菇的菌種培養(yǎng)基及其制備方法及利用其的菌種培養(yǎng)方法。

背景技術(shù)

冬小包腳菇(Volvariella?brumalis?He?sp.)，俗稱低溫草菇、谷樁菌、雞絲菌。野生冬小包腳菇僅貴州有分布報(bào)道，每年11月至翌年4月，生長(zhǎng)于收割水稻后種植小麥、油菜、蠶豆、豌豆、馬鈴薯等作物地里。該菌是草菇屬中目前發(fā)現(xiàn)的唯一低溫型品種，填補(bǔ)了現(xiàn)有草菇屬均為中高溫型的缺陷。該菌菇肉細(xì)嫩、味道鮮美、營(yíng)養(yǎng)豐富，具有很大的開(kāi)發(fā)利用價(jià)值。但是，有關(guān)冬小包腳菇的菌種分離及培養(yǎng)技術(shù)卻是現(xiàn)有技術(shù)中的空白，嚴(yán)重制約著該產(chǎn)業(yè)的發(fā)展。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于設(shè)計(jì)一種冬小包腳菇的菌種培養(yǎng)基及其制備方法及利用其的菌種培養(yǎng)方法。

為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案如下：

一種冬小包腳菇的菌種培養(yǎng)基，質(zhì)量百分百：玉米芯80％，米糠18％，過(guò)磷酸鈣1％，葡萄糖1％；

要求：

玉米芯：無(wú)霉變，含水量≤12％，粉碎顆粒≤5mm；

米糠：無(wú)霉變，含水量≤13％；

過(guò)磷酸鈣：含有效P₂O₅14％～20％，其中80％～95％溶于水；

葡萄糖：化學(xué)純；

所述培養(yǎng)基的水分，含水量達(dá)到：50％～55％。

一種冬小包腳菇的菌種培養(yǎng)基的制備方法，包括步驟如下：

第一步，準(zhǔn)備原料：按照質(zhì)量百分比玉米芯80％，米糠18％，過(guò)磷酸鈣1％，葡萄糖1％；

要求：

玉米芯：無(wú)霉變，含水量≤12％，粉碎顆粒≤5mm；

米糠：無(wú)霉變，含水量≤13％；

過(guò)磷酸鈣：含有效P₂O₅14％～20％，其中80％～95％溶于水；

葡萄糖：化學(xué)純；

第二步，培養(yǎng)基制作：稱取上述配方的玉米芯于容器中，加入沸水使其全部淹沒(méi)原料，浸泡0.8h～1.2h，過(guò)濾去水分，加入上述配方的米糠、過(guò)磷酸鈣、蔗糖，攪拌均勻，形成培養(yǎng)基；檢查并調(diào)整所述培養(yǎng)基的水分，含水量50％～55％。

還包括步驟如下：

第三步，裝瓶：將第二步中制備的培養(yǎng)基裝入菌種瓶中，裝量至菌種瓶瓶肩，壓緊瓶?jī)?nèi)表面的培養(yǎng)基，松緊程度為：將菌種瓶倒置，培養(yǎng)基不下落；然后，用清水洗凈瓶外，再用紗布伸進(jìn)瓶?jī)?nèi)，洗凈瓶口瓶肩，擦干瓶口水分，塞上棉塞，用牛皮紙抱住瓶口，捆扎；

第四步，滅菌：所述菌種瓶放入高壓蒸汽滅菌鍋中，在1.5kg/cm²壓力下，保持1h；將滅菌好的所述菌種瓶移到超凈工作臺(tái)內(nèi)，讓其自然冷卻，形成成品菌種瓶。

一種利用所述的冬小包腳菇的菌種培養(yǎng)基的冬小包腳菇的菌種培養(yǎng)方法，包括步驟如下：

第一步，菌種分離：

1)取當(dāng)天采集的新鮮未全開(kāi)傘的冬小包腳菇子實(shí)體，剪去菌柄基部泥土，用無(wú)菌濕脫脂棉擦去菌蓋上的雜物，裝入經(jīng)過(guò)滅菌的塑料袋，放到塑料盒中并及時(shí)帶回實(shí)驗(yàn)室；

2)用75％酒精棉擦拭所述無(wú)菌塑料袋外壁，移到超凈工作臺(tái)，無(wú)菌條件下，用解剖刀劃開(kāi)所述無(wú)菌塑料袋一小口，使菌蓋頂部剛好露出，再用解剖刀削去菌蓋表皮，露出菌蓋內(nèi)的白色組織，挑取白色組織約5mm大小作為組織塊，將所述組織塊接入菌種瓶培養(yǎng)基中部，使其與培養(yǎng)基有較好接觸。

第二步，培養(yǎng)并轉(zhuǎn)接：

1)將所述成品菌種瓶置于18℃～22℃恒溫箱培養(yǎng)。每天觀察接入的所述組織塊的萌發(fā)狀況：若所述組織塊及周圍無(wú)污染，單菌落，為正常，菌種分離成功；否則為污染，要及時(shí)檢出；

2)對(duì)上述正常萌發(fā)，形成單一菌落的所述菌種瓶，不等長(zhǎng)滿瓶，當(dāng)菌絲開(kāi)始吃料，在培養(yǎng)基上形成一圈直徑為2.5cm～3.5cm菌落時(shí)，及時(shí)轉(zhuǎn)接，使之純化；轉(zhuǎn)接所使用的培養(yǎng)基和第一步中的培養(yǎng)基相同，轉(zhuǎn)接方法如下：

S1，在超凈工作臺(tái)無(wú)菌條件下，用接種針挑取菌落的邊緣菌絲體，轉(zhuǎn)接到另一個(gè)菌種瓶培養(yǎng)基上，置于18℃～22℃恒溫箱培養(yǎng)；每天觀察接入菌體生長(zhǎng)狀況，菌絲吃料，生長(zhǎng)整齊，濃密，健壯，無(wú)污染，為正常，進(jìn)入下一步；

S2，再按相同方法，再進(jìn)行2次以上的轉(zhuǎn)接，形成為冬小包腳菇菌種。