[發(fā)明專利]一種冬小包腳菇的菌種培養(yǎng)基及其制備方法及利用其的菌種培養(yǎng)方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201410234837.2
• 申請日: 2014-05-29
• 公開（公告）號: CN103980027A
• 公開（公告）日: 2014-08-13
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 潘高潮;夏榮盛;鄒方倫;龍漢武;陳宵
• 申請（專利權(quán)）人: 貴州省山地資源研究所
• 主分類號: C05G1/00
• 分類號: C05G1/00;A01G1/04
• 代理公司: 北京眾合誠成知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11246
• 代理人: 龔燮英

1.一種冬小包腳菇的菌種培養(yǎng)基，其特征在于：

質(zhì)量百分百：玉米芯80％，米糠18％，過磷酸鈣1％，葡萄糖1％；

要求：

玉米芯：無霉變，含水量≤12％，粉碎顆粒≤5mm；

米糠：無霉變，含水量≤13％；

過磷酸鈣：含有效P₂O₅14％～20％，其中80％～95％溶于水；

葡萄糖：化學(xué)純；

所述培養(yǎng)基的水分，含水量達(dá)到：50％～55％。

2.一種根據(jù)權(quán)利要求1所述的冬小包腳菇的菌種培養(yǎng)基的制備方法，其特征在于，包括步驟如下：

第一步，準(zhǔn)備原料：按照質(zhì)量百分比玉米芯80％，米糠18％，過磷酸鈣1％，葡萄糖1％；

要求：

玉米芯：無霉變，含水量≤12％，粉碎顆粒≤5mm；

米糠：無霉變，含水量≤13％；

過磷酸鈣：含有效P₂O₅14％～20％，其中80％～95％溶于水；

葡萄糖：化學(xué)純；

第二步，培養(yǎng)基制作：稱取上述配方的玉米芯于容器中，加入沸水使其全部淹沒原料，浸泡0.8h～1.2h，過濾去水分，加入上述配方的米糠、過磷酸鈣、蔗糖，攪拌均勻，形成培養(yǎng)基；檢查并調(diào)整所述培養(yǎng)基的水分，含水量50％～55％。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的冬小包腳菇的菌種培養(yǎng)基的制備方法，其特征在于：還包括步驟如下：

第三步，裝瓶：將第二步中制備的培養(yǎng)基裝入菌種瓶中，裝量至菌種瓶瓶肩，壓緊瓶內(nèi)表面的培養(yǎng)基，松緊程度為：將菌種瓶倒置，培養(yǎng)基不下落；然后，用清水洗凈瓶外，再用紗布伸進(jìn)瓶內(nèi)，洗凈瓶口瓶肩，擦干瓶口水分，塞上棉塞，用牛皮紙抱住瓶口，捆扎；

第四步，滅菌：所述菌種瓶放入高壓蒸汽滅菌鍋中，在1.5kg/cm²壓力下，保持1h；將滅菌好的所述菌種瓶移到超凈工作臺內(nèi)，讓其自然冷卻，形成成品菌種瓶。

4.一種利用權(quán)利要求1所述的冬小包腳菇的菌種培養(yǎng)基的冬小包腳菇的菌種培養(yǎng)方法，其特征在于，包括步驟如下：

第一步，菌種分離：

1)取當(dāng)天采集的新鮮未全開傘的冬小包腳菇子實(shí)體，剪去菌柄基部泥土，用無菌濕脫脂棉擦去菌蓋上的雜物，裝入經(jīng)過滅菌的塑料袋，放到塑料盒中并及時(shí)帶回實(shí)驗(yàn)室；

2)用75％酒精棉擦拭所述無菌塑料袋外壁，移到超凈工作臺，無菌條件下，用解剖刀劃開所述無菌塑料袋一小口，使菌蓋頂部剛好露出，再用解剖刀削去菌蓋表皮，露出菌蓋內(nèi)的白色組織，挑取白色組織約5mm大小作為組織塊，將所述組織塊接入菌種瓶培養(yǎng)基中部，使其與培養(yǎng)基有較好接觸。

第二步，培養(yǎng)并轉(zhuǎn)接：

1)將所述成品菌種瓶置于18℃～22℃恒溫箱培養(yǎng)。每天觀察接入的所述組織塊的萌發(fā)狀況：若所述組織塊及周圍無污染，單菌落，為正常，菌種分離成功；否則為污染，要及時(shí)檢出；

2)對上述正常萌發(fā)，形成單一菌落的所述菌種瓶，不等長滿瓶，當(dāng)菌絲開始吃料，在培養(yǎng)基上形成一圈直徑為2.5cm～3.5cm菌落時(shí)，及時(shí)轉(zhuǎn)接，使之純化；轉(zhuǎn)接所使用的培養(yǎng)基和第一步中的培養(yǎng)基相同，轉(zhuǎn)接方法如下：

S1，在超凈工作臺無菌條件下，用接種針挑取菌落的邊緣菌絲體，轉(zhuǎn)接到另一個(gè)菌種瓶培養(yǎng)基上，置于18℃～22℃恒溫箱培養(yǎng)；每天觀察接入菌體生長狀況，菌絲吃料，生長整齊，濃密，健壯，無污染，為正常，進(jìn)入下一步；

S2，再按相同方法，再進(jìn)行2次以上的轉(zhuǎn)接，形成為冬小包腳菇菌種。