[發明專利]利用螺旋藻泥制備高活性小肽的方法

在審

• 申請號: 201410231192.7
• 申請日: 2014-05-29
• 公開（公告）號: CN103981245A
• 公開（公告）日: 2014-08-13
• 發明（設計）人: 薛命雄;趙述淼;余頡
• 申請（專利權）人: 薛命雄;趙述淼
• 主分類號: C12P21/06
• 分類號: C12P21/06
• 代理公司: 北海市海城區佳旺專利代理事務所(普通合伙) 45115
• 代理人: 黃建中

技術領域

本發明涉及的是利用螺旋藻泥制備高活性小肽的方法，屬生物技術領域。

背景技術

螺旋藻又稱藍細菌，是一種絲狀多細胞螺旋體的原核藻類生物，屬于藍藻門顫藻科。螺旋藻具有很高的營養價值，其蛋白質含量高達60%~70%，是目前已知食物中最高的，而且含有豐富的氨基酸、維生素、脂肪、類胡蘿卜素、多糖以及礦物質，是人類理想的食物及藥物資源。大量的研究表明，螺旋藻具有抗病毒、抑癌癥、抗氧化、抗輻射、降血脂、增強免疫力等功能。因此，螺旋藻具有廣闊的開發前景。生物活性肽是由氨基酸組成的具有生物活性的肽類化合物，一般是以植物或動物蛋白為原料，利用化學方法將蛋白質水解而制成。小分子的活性肽不僅能夠提供機體生長發育所需的營養物質，而且具有增強免疫力、降血栓、抑制細菌、降血壓、抗氧化等功能。與游離氨基酸和蛋白質相比，小分子的活性肽能夠更好、更快地被機體吸收。因此，越來越多的研究者開始關注生物活性肽，小肽的制備、分離、純化、提取及其所具有的生物活性已經成為研究的熱點，并且取得不少的成果。

高蛋白含量的生物活性小肽作為一種新型的飼料添加劑日益受到人們的關注。螺旋藻含有豐富的蛋白質，是極佳的蛋白質來源，目前以螺旋藻泥為蛋白原料生產高活性小肽的研究鮮有報道，傳統的螺旋藻加工方法就是采集螺旋藻泥后，通過干燥把水份去掉，這樣取得的螺旋藻得到的蛋白是粗蛋白，與小分子活性肽有著很大的區別，這些區別表現在小分子活性肽比蛋白質有更好的吸收率、更好的生物利用度及生理活性。因此，利用螺旋藻泥制備小分子活性肽是非常有意義的，本發明提供了以螺旋藻泥為主要原料進行酶解制備高活性小肽的生產方法，用本發明方法能制備出高質量的小分子活性肽。

發明內容

本發明的目的是提供一種利用螺旋藻泥制備高活性小肽的方法，用生物酶將螺旋藻泥進行酶解，得到酶解產物小分子活性肽，克服傳統螺旋藻泥加工方式所存在的不足，使得螺旋藻的加工產物具有更高的吸收率理好的生物利用度。

上述發明目的通過下述技術方案實現，利用螺旋藻泥制備高活性小肽的方法，包括下述具體步驟：

（1）稱取一定量的螺旋藻泥，按照料水重量比是1：6-10的比例于螺旋藻泥中加入水，使螺旋藻泥均勻分散于水中，得到螺旋藻泥混懸液備用；

（2）用1mol/L?NaOH溶液調節螺旋藻泥混懸液的酸堿度，使pH值是7.5-8.5，加入活性是10-150萬u/g生物酶，所加的酶用量使得酶底比達到600-700u/g，調整螺旋藻泥混懸液的酶解溫度是45-70℃，酶解3-10小時，得到螺旋藻酶解液備用；

（3）螺旋藻酶解液煮沸滅酶活10?min，迅速冷卻，6000r/min離心10min，得到螺旋藻小肽酶解液，噴霧干燥后得到螺旋藻小分子活性肽；

上述方法的步驟（2）的優選方法是：用1mol/L?NaOH溶液調節螺旋藻泥混懸液的酸堿度，使pH值是8.5，加入活性是10-150萬u/g生物酶，所加的酶用量使得酶底比達到700u/g，調整螺旋藻泥混懸液的酶解溫度是55℃，酶解3小時，得到螺旋藻酶解液備用；

所述生物酶指的是：堿性蛋白酶、植物蛋白水解復合酶或菠蘿蛋白酶。

采取上述措施的本發明，對制備條件進行了深入的研究，基于所選制備條件的本發明制備的螺旋藻活性肽的水解度(DH)為11.82%，三氯乙酸-可溶性氮指數（TCA-SNI）為55.13%。利用高效凝膠過濾色譜法對酶解產物進行分子量的測定，結果顯示：分子量小于1000?Da的寡肽占66.6%，小肽分子量分布主要集中在260?Da附近，約2個氨基酸殘基，含量為39.57%。將噴霧干燥后的酶解產物與血漿蛋白進行對比，酶解產物（上清）的粗蛋白含量為64.89%，小肽含量為35.67%；血漿蛋白的粗蛋白含量為75.84%，小肽含量為1.15%；?酶解產物總磷含量為1.64%，是血漿蛋白的11倍；鈣含量為0.20%，鐵含量為125.6?mg/kg，與血漿蛋白相當；賴氨酸含量為2.45%，組氨酸含量為3.20%，蛋氨酸含量為4.98%。酶解產物具有抗氧化性，其DPPH自由基清除率為61.30%，而且本發明所制備的螺旋藻活性小肽更容易被機體吸收，所以酶解產物與血漿蛋白相比有一定的優勢，具有成為高檔蛋白飼料原料替代血漿蛋白的潛力。

具體實施方式

實施例1

（1）稱取100公斤的螺旋藻泥，加入600公斤的水，使螺旋藻泥均勻分散于水中，得到螺旋藻泥混懸液備用；