[發明專利]一種桑葉中阿苯達唑持留量的測定方法

有效

• 申請號: 201410229278.6
• 申請日: 2014-05-27
• 公開（公告）號: CN103969374A
• 公開（公告）日: 2014-08-06
• 發明（設計）人: 楊瓊;李麗;邢東旭;肖陽;李慶榮;葉明強
• 申請（專利權）人: 廣東省農業科學院蠶業與農產品加工研究所
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 廣州市華學知識產權代理有限公司 44245
• 代理人: 裘暉

技術領域

本發明屬于藥物檢測技術領域，具體涉及一種桑葉中阿苯達唑持留量的測定方法。

背景技術

中國蠶桑具有5000多年的歷史，我國蠶絲及其絲綢制品的產銷量約占世界總量的70％，是唯一可壟斷世界貿易市場的出口商品。家蠶微粒子病因其具有胚種傳染能力而對蠶種生產具有毀滅性的影響，是世界產絲國的檢疫對象。近二十余年來，家蠶微粒子病在我國呈全國流行趨勢，淘汰超毒蠶種量達數百萬張，經濟損失慘重。現有研究表明阿苯達唑是治療家蠶微粒子病較理想的藥物(楊瓊，邢東旭，廖森泰等.家蠶微粒子病治療藥物的研究.廣東蠶業，2010，44:35-37)。

阿苯達唑(albendazole，ABZ)是一種高效低毒，對線蟲、吸蟲及絳蟲均具有較強驅防效應的苯并咪唑類藥物，已被廣泛應用于人體醫學、畜禽養殖、水產養殖等多個領域。其在體內代謝為亞砜類或砜類后，抑制寄生蟲對葡萄糖的吸收，導致蟲體糖原耗竭，或抑制延胡索酸還原酶系統，阻礙ATP產生，使寄生蟲無法存活和繁殖。目前，阿苯達唑作為飼料添加劑或配制成懸濁液噴灑桑葉是給家蠶喂食阿苯達唑的兩種有效途徑，對于廣大蠶農而言，后者可操作性和經濟性更強，更容易被接受。因此，噴灑在桑葉上阿苯達唑持留量的動態變化規律及其在桑葉上的藥效期成為蠶桑業關注的焦點。然而，目前在闡明桑葉阿苯達唑持留量和藥效隨時間降解變化規律尚需要建立測定桑葉上阿苯達唑含量的方法。

早在20世紀80年代初，國外已有對不同生物材料中阿苯達唑及其代謝物殘留量測定方法的研究報道，Alvinerie和Galtier(Alvinerie M,Galtier P.Simultaneous determination of albendazole and its principal metabolites in plasma by normal phase high-performance liquid chromatography.Journal of Pharmaceutical&Biomedical Analysis，1984，2：73-79)利用正向高效液相色譜實現了綿羊血漿中阿苯達唑及其代謝物的同時測定，使用的UV檢測器靈敏度較低。到了21世紀初，國內外在人體醫學、畜禽養殖、水產養殖等多領域對各種生物組織材料中丙硫咪唑或苯并咪唑類物質測定方法的研究報道也逐漸豐富起來，如免疫分析法、毛細管電泳法、氣-質聯用法，液-質聯用法等。Kitzman等(Dennis K，Cheng K，Fleckenstein L，HPLC assay for albendazole and metabolites in human plasma for clinical pharmacokinetic studies.Journal of Pharmaceutical and Biomedical Analysis，2002，30：801-813)利用C18固相萃取柱對含阿苯達唑的人體血樣在HPLC上機前進行萃取，能有效祛除雜質、排除干擾；Mottier等(Mottier L，Alvarez L，Lanusse C，Quantitative chromatographic determination of several benzimidazole anthelmintic molecules in parasite material.Journal of Chromatography B，2003，798：117-125)也利用固相萃取柱、反向HPLC技術同時對綿羊、牛等絳蟲寄主體內的苯并咪唑類藥物含量進行了測定；林海丹等(林海丹，謝守新，吳映璇.固相萃取高效液相色譜法測定乳粉中苯并咪唑類藥物殘留.分析試驗室，2005，24：27-29)建立了固相萃取高效液相色譜測定乳粉中苯并咪唑類藥物殘留的方法；劉勇軍等(劉勇軍，吳銀良，姜艷彬，劉興國，王海.固相萃取高效液相色譜法測定豬肉中六種苯并咪唑類藥物殘留的研究.食品科學，2009，30：212-214)也成功利用了固相萃取高效液相色譜法對豬肉中六種苯并咪唑類藥物殘留量進行了研究。這些已有的測定技術大多是通過固相萃取來達到待測物質與基體的分離純化，然后利用高效液相色譜進行檢測，這些方法均具有針對性強，靈敏度高和檢測速率快的優越性。然而，由于植物基體組織與動物基體組織的成分差異，導致現有技術的固相萃取條件并不能實現植物基體組織中阿苯達唑的分離純化，特別是桑葉中的黃酮類、生物堿和植物甾醇等成分會對阿苯達唑的檢測產生嚴重的干擾，從而無法直接用高效液相色譜對桑葉基體組織中阿苯達唑的含量進行測定。

發明內容