[發(fā)明專利]一種桑葉中阿苯達(dá)唑持留量的測(cè)定方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201410229278.6
• 申請(qǐng)日: 2014-05-27
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN103969374A
• 公開(kāi)（公告）日: 2014-08-06
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 楊瓊;李麗;邢東旭;肖陽(yáng);李慶榮;葉明強(qiáng)
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 廣東省農(nóng)業(yè)科學(xué)院蠶業(yè)與農(nóng)產(chǎn)品加工研究所
• 主分類號(hào): G01N30/02
• 分類號(hào): G01N30/02;G01N30/06
• 代理公司: 廣州市華學(xué)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 44245
• 代理人: 裘暉

1.一種桑葉中阿苯達(dá)唑持留量的測(cè)定方法，其特性在于：具體操作步驟如下：

(1)樣品提取：用乙腈萃取桑葉得到萃取液，萃取液濃縮后加入甲醇-二氯甲烷混合液溶解得到待凈化液；

(2)樣品純化：采用氨基固相萃取柱，先用甲醇：二氯甲烷的體積比為(5～20)：(80～95)的甲醇-二氯甲烷混合液淋洗活化固相萃取柱，然后加入步驟(1)中的待凈化液，用甲醇：二氯甲烷的體積比為(1～10)：(90～99)的甲醇-二氯甲烷混合液淋洗，收集洗脫液后濃縮，用甲醇溶解定容，過(guò)微孔濾膜得到待檢測(cè)液；

(3)樣品檢測(cè)：采用液相色譜對(duì)步驟(2)中待檢測(cè)液進(jìn)行檢測(cè)，通過(guò)與標(biāo)準(zhǔn)曲線的比對(duì)得出樣品中阿苯達(dá)唑的濃度并計(jì)算出阿苯達(dá)唑在桑葉中的持留量。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種桑葉中阿苯達(dá)唑持留量的測(cè)定方法，其特征在于：步驟(1)中所述樣品提取的具體步驟為：稱取0.6～1.0質(zhì)量份干桑葉粉，用60～100質(zhì)量份乙腈浸泡，渦旋振蕩提取10～30min，真空抽濾料液，濾液轉(zhuǎn)到具塞量筒中，加4～8質(zhì)量份NaCl，振搖后靜置分層，吸取30.0～50.0質(zhì)量份上層乙腈溶液于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀濃縮至質(zhì)量的1/15～1/25，加入1～3質(zhì)量份體積比為10：90的甲醇-二氯甲烷混合液溶解得到待凈化液。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種桑葉中阿苯達(dá)唑持留量的測(cè)定方法，其特征在于：步驟(2)中所述氨基固相萃取柱規(guī)格為體積3～6mL，填料量300～500mg；所述微孔濾膜的孔徑為0.22～0.45μm。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種桑葉中阿苯達(dá)唑持留量的測(cè)定方法，其特征在于：步驟(3)中所述標(biāo)準(zhǔn)曲線的制備方法為：精確稱取阿苯達(dá)唑標(biāo)準(zhǔn)品25mg，在100mL乙腈中振蕩至完全溶解，得到250μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，再用乙腈將其稀釋成濃度分別為5μg/mL、15μg/mL、30μg/mL、100μg/mL、125μg/mL、250μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液，標(biāo)準(zhǔn)溶液分別用液相色譜進(jìn)行檢測(cè)，繪制溶液濃度與峰面積的標(biāo)準(zhǔn)曲線。

5.根據(jù)權(quán)利要求1或4所述的一種桑葉中阿苯達(dá)唑持留量的測(cè)定方法，其特征在于：所述液相色譜的色譜條件為：

色譜柱：Hypersil BDS C18，300mm×4.0mm，5μm；

流動(dòng)相：體積比為(20～33)：(30～66)：(1～5)的乙腈-水-冰乙酸溶液；

柱溫：35～40℃；流速：1.0mL/min；

進(jìn)樣量：10μL；檢測(cè)器波長(zhǎng)：254～292nm。