[發(fā)明專利]葡萄糖氧化酶制劑的制備方法及其利用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201410228211.0
• 申請日: 2014-05-27
• 公開（公告）號: CN103966179A
• 公開（公告）日: 2014-08-06
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 胡常英;王云鵬;秦艷梅;馬清河;胡科峰;秦慧娟;蔡建成;李軍;章淑艷;劉麗娜;范星;韓韜;李賓;趙從波;羅同陽;高慶華;鄭翔
• 申請（專利權(quán)）人: 河北省微生物研究所
• 主分類號: C12N9/04
• 分類號: C12N9/04;A23L1/015;A23K1/165;C12R1/825
• 代理公司: 石家莊海天知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 13101
• 代理人: 田文其

1.葡萄糖氧化酶制劑的制備方法，其特征在于將特異青霉ACCC30443接種于含有碳源、氮源、無機(jī)鹽及微量元素的發(fā)酵培養(yǎng)基的發(fā)酵罐進(jìn)行通氣發(fā)酵制成發(fā)酵液，發(fā)酵液經(jīng)固液分離制成葡萄糖氧化酶制劑；發(fā)酵培養(yǎng)基由如下質(zhì)量百分?jǐn)?shù)的組分組成：

蔗糖6％-8％，硝酸鈉0.5％-0.7％，磷酸氫二鉀0.01％-0.03％，硫酸鎂0.04％-0.06％，氯化鉀0.04％-0.06％，余量為水，自然pH值；

通氣發(fā)酵的工藝條件如下：

接種量為種子體積∶發(fā)酵培養(yǎng)基體積＝0.7-0.9∶100溫度27℃-29℃,通氣量1∶0.7-0.9vvm，壓力為0.03Mpa-0.05Mpa，培養(yǎng)周期為不低于60小時(shí)。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的葡萄糖氧化酶制劑的制備方法，其特征在于所述的特異青霉ACCC30443在接入發(fā)酵培養(yǎng)基前經(jīng)過擴(kuò)大培養(yǎng)。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的葡萄糖氧化酶制劑的制備方法，其特征在于所述的擴(kuò)大培養(yǎng)包括斜面菌種的制備、一級液體種子的制備以及二級液體種子的制備。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的葡萄糖氧化酶制劑的制備方法，其特征在于所述的斜面菌種的制備中培養(yǎng)基采用察氏培養(yǎng)基，溫度為26℃-29℃，培養(yǎng)周期4—5天。

5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的葡萄糖氧化酶制劑的制備方法，其特征在于所述的一級液體種子的制備包括如下工藝步驟：

將斜面菌種按每只斜面接三瓶的接種量接種到一級種子培養(yǎng)基中，在27℃-29℃條件下振蕩培養(yǎng)不低于28小時(shí)制成一級種子，裝量為1000mL的三角瓶裝入200mL一級種子培養(yǎng)基，以鏡檢孢子萌發(fā)、菌絲開始生長為培養(yǎng)終點(diǎn)。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的葡萄糖氧化酶制劑的制備方法，其特征在于所述的二級液體種子的制備包括如下工藝步驟：

按照一級種子的體積∶二級種子培養(yǎng)基的體積比＝1.3-1.6∶100將一級種子接入滅菌后的二級種子培養(yǎng)基，裝量為體積比＝60-70:100，在溫度為27℃-29℃，通氣量為1∶0.5-0.7vvm，壓力為0.03Mpa-0.05Mpa的條件下進(jìn)行不低于28小時(shí)的通氣發(fā)酵制成二級種子，以鏡檢菌絲斷裂、生長均勻一致為發(fā)酵終點(diǎn)。

7.根據(jù)權(quán)利要求5或6中任一項(xiàng)所述的葡萄糖氧化酶制劑的制備方法，其特征在于所述的一級種子培養(yǎng)基和二級種子培養(yǎng)基采用如下質(zhì)量份數(shù)的原料組成：

蔗糖5％-7％，硝酸鈉0.4％-0.6％，磷酸氫二鉀0.01％-0.03％，硫酸鎂0.04％-0.06％，氯化鉀0.04％-0.06％，余量為水,自然pH值。

8.根據(jù)權(quán)利要求5或6中任一項(xiàng)所述的葡萄糖氧化酶制劑的制備方法，其特征在于所述的發(fā)酵液的固液分離采用板框進(jìn)行。

9.利用權(quán)利要求1-6中任一項(xiàng)所述的制備方法獲得的葡萄糖氧化酶制劑在降解黃曲霉毒素B₁應(yīng)用。