[發明專利]利用葡萄酒廠廢水養殖亞心形四爿藻的培養基及培養方法

有效

• 申請號: 201410222837.0
• 申請日: 2014-05-26
• 公開（公告）號: CN103966101A
• 公開（公告）日: 2014-08-06
• 發明（設計）人: 王培磊
• 申請（專利權）人: 臨沂大學
• 主分類號: C12N1/12
• 分類號: C12N1/12;C12R1/89
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種利用葡萄酒廠廢水養殖亞心形四爿藻的培養基，配方如下：

葡萄酒廠廢水120毫升，尿素25毫克，海泥抽取液1.5毫升，土壤抽出液1.2毫升，牛糞浸出液1.5毫升，兔糞浸出液1.8毫升，L-半胱氨酸1.0毫克，酪蛋白胨18毫克，甘油20毫克，番茄汁1.5毫升，葡萄糖25毫克，乳糖18毫克，淀粉50毫克，酵母膏35毫克，硝酸銨15毫克，硅藻土25毫克，麥飯石粉15毫克，氯化錳5毫克，磷酸二氫鈉12毫克，S3維生素溶液1.0毫升，人尿1.0毫升，次氯酸鈉消毒后的純凈海水1000毫升，

其中S3維生素溶液配方：硫胺素鹽酸鹽50毫克，尼古丁酸10毫克，泛酸鈣10毫克，對氨安息香酸1.0克，維生素H0.1克，肌醇0.5克，葉酸0.2微克，胸間氮苯0.3克，蒸餾水1000毫升。

2.一種利用葡萄酒廠廢水養殖亞心形四爿藻方法，具體步驟如下：

培養容器為圓柱體聚乙烯水塔，容積3.0立方米，高密度聚乙烯材料制成，無色或白色，有較好的透光性，以利藻類進行光合作用，水塔為一體式構造，壁厚6毫米，具有很大的強度和堅固性，水塔頂部有一圓形蓋子，水塔底部是一角鐵焊接成的底座，高35厘米，水塔頂部蓋子直徑40厘米，蓋子打上3個孔，一個孔插入充氣管，另一個孔插入排氣管，充氣管和排氣管都是玻璃管，內徑10毫米，將反應器洗刷干凈，后用蒸餾水潤洗3遍，裝入權利要求1所述的培養基2000升，充氣混合5分鐘，選擇生命力旺盛、無污染的亞心形四爿藻接種，接種密度4×10⁴cell/mL，蓋子上插入兩根干凈玻璃管，一根較長，65厘米，頂端露出蓋子12厘米，下端通過料管與散氣石連接，用以充氣，所述散氣石的作用是形成很小的氣泡，避免大氣泡或翻滾的波浪打碎藻細胞；另一根較短，30厘米，兩端露出蓋子即可，用以排氣，兩根玻璃管同樣粗細，內徑10毫米；還有一個孔穿入電源導線，端部連接一40瓦的節能燈，用以夜間光照，用干凈的透明膠帶將兩根玻璃管固定，長的玻璃管上端用料管與充氣泵相連，充入混合氣體，混合氣體成分和體積比例是(空氣∶純二氧化碳∶臭氧∶氨氣)＝92％∶6％∶1％∶1％；連續充氣，充氣量不宜太大，以藻細胞浮起不下沉即可，室外培養，太陽光照射，最佳溫度25±2℃，最佳光照強度3000-10000Lux，白天利用太陽光自然光照，夜間采用節能燈光照，培養的前5天，水塔上方搭建一簡易棚，上放置簾子遮擋光線，使光照強度維持在1500-4000Lux，避免強烈陽光對細胞造成的光傷害，第6天撤掉簾子，較強的光照有利于細胞的生長繁殖和高不飽和脂肪酸的合成，培養至第7天，停止充氣，拿開蓋子，補充新鮮培養基100升，蓋上蓋子，充氣，繼續培養，至第9天，亞心形四爿藻密度增加至500×10⁴cell/mL，停止培養，從底部的水龍頭放出藻液，將培養容器洗刷干凈后，加入0.2％過氧乙酸消毒溶液浸泡消毒2小時，再用蒸餾水潤洗2遍，后進入下一輪培養。

3.根據權利要求2所述的一種利用葡萄酒廠廢水養殖亞心形四爿藻方法，其特征在于對選用的所述的反應器，洗刷干凈后進行消毒，使用紫外燈消毒，消毒10-20分鐘。

4.根據權利要求2所述的一種利用葡萄酒廠廢水養殖亞心形四爿藻方法，其特征在于對選用的所述的反應器，洗刷干凈后進行消毒，使用高壓氮氣噴射消毒，消毒5-10分鐘。

5.根據權利要求2所述的一種利用葡萄酒廠廢水養殖亞心形四爿藻方法，其特征在于對選用的所述的反應器，洗刷干凈后進行消毒，使用高壓二氧化碳噴射消毒，消毒5-6分鐘。

6.根據權利要求2所述的一種利用葡萄酒廠廢水養殖亞心形四爿藻方法，其特征在于對選用的所述的反應器，洗刷干凈后分兩個階段消毒，先使用高壓氮氣噴射消毒，消毒2-3分鐘，使用高壓二氧化碳噴射消毒，消毒2-3分鐘，消毒完畢后再進行藻類培養。