[發(fā)明專利]一種使用薄層色譜板檢測黃酒中生物胺的方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201410217792.8
• 申請日: 2014-05-21
• 公開（公告）號: CN103983733A
• 公開（公告）日: 2014-08-13
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 毛健;黃桂東;魏曉璐
• 申請（專利權(quán)）人: 江南大學
• 主分類號: G01N30/90
• 分類號: G01N30/90
• 代理公司: 北京愛普納杰專利代理事務(wù)所(特殊普通合伙) 11419
• 代理人: 何自剛;王玉松

1.一種使用薄層色譜板檢測黃酒中生物胺的方法，其特征在于，是利用衍生化試劑對黃酒樣品中的生物胺進行衍生化處理，使其帶上發(fā)光基團，然后采用薄層色譜分析儀對生物胺進行分析。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述衍生化是將黃酒樣置于離心管中，再向離心管中加入飽和NaHCO₃溶液使之呈堿性，再加入衍生化試劑，在渦流混合器上渦旋混勻，于黑暗恒溫條件下衍生，然后取出在室溫下放置幾分鐘后，加入1/2樣品溶液體積的飽和NaCl溶液，再加入與樣品溶液等體積的有機溶劑萃取，待分層后取上層有機相用于分析；所述衍生化試劑是丹磺酰氯，溶解于丙酮，濃度為1～10mg/mL，用量為1-5倍樣品溶液體積，衍生溫度為25℃～60℃，衍生時間為10min～60min。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述生物胺包括尸胺、組胺、酪胺、亞精胺、精胺、腐胺、色胺。

4.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法，其特征在于，采用薄層色譜分析儀對生物胺進行分析時，展開劑為按體積比2:1～6:1混合的氯仿:三乙胺或按體積比2:1:1～6:4:1混合的氯仿:乙醚:三乙胺。

5.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的方法，其特征在于，主要包括以下步驟：

(1)衍生：分別取一定量的待衍生標準溶液或黃酒樣于塑料離心管中，在每個離心管中加入一定體積的飽和NaHCO₃溶液使之呈堿性，再加入1-5倍樣品溶液體積的衍生化試劑，在渦流混合器上渦旋混勻，置于黑暗25℃～60℃衍生10min～60min，取出；在室溫下放置幾分鐘后，加入1/2樣品溶液體積的飽和NaCl溶液，再加入與樣品溶液等體積的有機溶劑萃取，待分層后取上層有機相在薄層硅膠板上點樣；

(2)點樣、分離：在硅膠薄層玻璃板上進行衍生樣品的分離，樣品從距板的底部10mm處開始點樣，試樣之間的距離至少15mm；

(3)展開：在分析之前，層析缸需要用展開劑混合物飽和，然后將點樣后的硅膠薄層玻璃板置于裝有展開劑的薄層室中展開，混合物從盤的底部升到約19cm處停止，干燥；

(4)顯色：在紫外燈下顯色，與混合標準樣品進行比對，定性分析黃酒樣品中的生物胺種類。

(5)定量分析：采用薄層色譜儀在254nm條件下對色譜板進行掃描，根據(jù)樣品中斑點對應(yīng)的的峰面積定量計算黃酒中各生物胺含量及黃酒中生物胺的總量。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于，所述步驟(1)中有機溶劑為異己烷、乙醚或乙酸乙酯。

7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于，所述步驟(3)中展開劑為按體積比2:1～6:1混合的氯仿:三乙胺或按體積比2:1:1～6:4:1混合的氯仿:乙醚:三乙胺。

8.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于，所述步驟(3)中展開時間為1～2h。