[發明專利]一種藥物靶標捕獲方法有效
| 申請號: | 201410214864.3 | 申請日: | 2014-05-21 |
| 公開(公告)號: | CN104181221B | 公開(公告)日: | 2017-02-01 |
| 發明(設計)人: | 李進;楊本艷姿;竇登峰;葛嘯虎;宋宏梅;萬金橋;張艷;胡曉;王星;馮靜超;鐘國慶 | 申請(專利權)人: | 成都先導藥物開發有限公司 |
| 主分類號: | C12Q1/68 | 分類號: | C12Q1/68 |
| 代理公司: | 成都高遠知識產權代理事務所(普通合伙)51222 | 代理人: | 李高峽,杜朗宇 |
| 地址: | 610041 四川省成都市高新區*** | 國省代碼: | 四川;51 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 藥物 靶標 捕獲 方法 | ||
1.一種藥物靶標捕獲方法,其特征在于:包括如下步驟:
(1)取原料:取化合物以及DNA或RNA或其它特異親和材料的一方;
(2)連接:將化合物與DNA或RNA或其它特異親和材料的一方共價連接得化合物;
(3)轉運:用基因轉運方法,將步驟(2)得到的標簽化合物分別轉運至細胞內;
(4)靶標捕獲:將步驟(3)的細胞破碎,用固定化的互補DNA或RNA捕獲步驟(1)中的DNA或RNA、或用固定化特異親和材料的另一方來捕獲步驟(1)中的親和材料一方,將靶標富集;
(5)靶標識別;
(6)靶標確認,即可。
2.根據權利要求1所述的方法,其特征在于:
步驟(5)所述靶標識別是將富集的靶標從固定相上解離,用膠電泳的方法展開,用蛋白組學的方法,比較差異蛋白,從而識別潛在的靶標;
步驟(6)所述靶標確認是按優先級表達或購買(5)中識別的靶標,并逐一通過化合物與這些靶標的相互作用比較,最終達到化合物靶標的確認。
3.根據權利要求1所述的方法,其特征在于:步驟(1)中,所述化合物的分子量為100~4000Da。
4.根據權利要求1所述的方法,其特征在于:步驟(1)中,所述化合物為用于步驟(2)中共價連接的、經過化學修飾并具有與靶標化合物相似生物活性的化合物。
5.根據權利要求1所述的方法,其特征在于:步驟(1)所述的DNA或RNA為在所述范圍的任意序列并具有步驟(2)中用于與化合物共價連接的官能團。
6.根據權利要求1所述的方法,其特征在于:步驟(1)中,所述DNA或RNA的長度不小于5個堿基對或堿基。
7.根據權利要求1所述的方法,其特征在于:步驟(1)中,所述DNA或RNA標記有生物素或熒光或同位素或其它用于示蹤的標記。
8.根據權利要求1所述的方法,其特征在于:步驟(1)所述其它親和材料的一方為任意無明顯細胞毒性的、具有與步驟(2)中化合物共價連接的特異性親和材料對的一方。
9.根據權利要求1所述的方法,其特征在于:步驟(2)所述的標簽化合物為具有與待識別靶標化合物相似活性的化合物。
10.根據權利要求1所述的方法,其特征在于:步驟(3)中,所述基因轉運的方法是不造成明顯細胞損傷的所有轉運方法。
11.根據權利要求1所述的方法,其特征在于:步驟(3)中,所述基因轉運方法是陽離子脂質體轉染法、磷酸鈣法轉染法、納米顆粒轉染法或電穿孔轉染法以及其它能夠將核酸轉運至細胞內的技術手段。
12.根據權利要求2所述的方法,其特征在于:步驟(6)中,所述的相互作用為靶標與未經修飾的化合物的親和性。
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