[發(fā)明專利]一種半合成藥物中間體的質(zhì)量檢測(cè)方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201410214812.6
• 申請(qǐng)日: 2014-05-21
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN105092767A
• 公開(kāi)（公告）日: 2015-11-25
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 嚴(yán)潔;李軒
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 天津市漢康醫(yī)藥生物技術(shù)有限公司
• 主分類(lèi)號(hào): G01N30/89
• 分類(lèi)號(hào): G01N30/89
• 代理公司: 暫無(wú)信息
• 代理人: 暫無(wú)信息

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及藥物檢測(cè)領(lǐng)域，具體涉及一種半合成藥物中間體的質(zhì)量檢測(cè)方法。

背景技術(shù)

半合成藥物是指在天然藥物提取物的基礎(chǔ)上，進(jìn)行化合結(jié)構(gòu)改造，所獲得藥物的統(tǒng)稱。而天然藥物提取物的質(zhì)量對(duì)最后成藥的質(zhì)量至關(guān)重要。

天然藥物指紋圖譜是一種綜合的，可量化的鑒定手段，它是建立在天然藥物化學(xué)成分系統(tǒng)研究的基礎(chǔ)上，主要用于評(píng)價(jià)天然藥物及其提取物質(zhì)量的真實(shí)性、優(yōu)良性和穩(wěn)定性。

天然藥物及其提取物均為多組分復(fù)雜體系，因此評(píng)價(jià)其質(zhì)量應(yīng)采用與之相適應(yīng)的，能提供豐富鑒別信息的檢測(cè)方法，建立天然藥物指紋圖譜將能較為全面地反映天然藥物及其提取物中所含化學(xué)成分的種類(lèi)與數(shù)量，進(jìn)而對(duì)藥品質(zhì)量進(jìn)行整體描述和評(píng)價(jià)。天然藥物指紋圖譜的研究和建立，對(duì)于有效控制天然藥物的質(zhì)量具有重要意義。

近年來(lái)，現(xiàn)代中醫(yī)學(xué)研究表明，天然植物藥中的黃酮類(lèi)化合物具有降血糖和血脂、降低心肌耗氧量、軟化血管、抗心律不齊、使冠脈和腦血管流量增加等功能，植物中總黃酮測(cè)定有高效液相色譜法、毛細(xì)管電泳法、紫外分光光度法、氣相色譜法等方法，目前，一般采用高效液相色譜法對(duì)天然藥物中的總黃酮含量進(jìn)行測(cè)定。

本申請(qǐng)發(fā)明人對(duì)高效液相色譜法測(cè)定天然藥物中的黃酮類(lèi)化合物進(jìn)行研究，發(fā)現(xiàn)了一種便捷，靈敏度高的，能夠?qū)Χ喾N天然藥物中的黃酮類(lèi)化合物進(jìn)行測(cè)定，為產(chǎn)品的質(zhì)量得到更好的控制奠定基礎(chǔ)。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明涉及的是一種半合成藥物中間體的質(zhì)量檢測(cè)方法，能全面的分析藥物中的黃酮類(lèi)化合物成分，用以有效的控制產(chǎn)品的質(zhì)量。

本發(fā)明首先公開(kāi)了一種半合成藥物中間體的質(zhì)量檢測(cè)方法，采用HPLC指紋圖譜法進(jìn)行檢測(cè)，具體步驟如下：

1）取中間體粉末樣品和對(duì)照品粉末，精密稱定并以甲醇或乙醇為溶劑溶解、定容后，得供試品溶液和對(duì)照品溶液；

2）精密吸取供試品溶液或?qū)φ掌啡芤鹤⑷敫咝б合嗌V儀，采用反相色譜柱進(jìn)行HPLC分析，HPLC指紋圖譜法的條件為：柱溫20～30℃，流動(dòng)相為乙腈-水-磷酸系統(tǒng)，梯度洗脫，流速為0.7～1.5ml/mim，檢測(cè)波長(zhǎng)為370nm。

較優(yōu)的，步驟1）中所述溶劑為30～100v/v%甲醇水溶液或50v/v%乙醇水溶液；

最優(yōu)的，步驟1）中溶解藥物樣品的溶劑為50v/v%甲醇水溶液；溶解對(duì)照品的溶劑為100v/v%甲醇溶液。

較優(yōu)的，步驟1）所述溶解為超聲溶解。更優(yōu)的，步驟1）超聲溶解的時(shí)間為5～

30min。最優(yōu)的，步驟1）超聲溶解的時(shí)間為10min。

較優(yōu)的，步驟1）供試品溶液還需要經(jīng)0.22μm微孔濾膜過(guò)濾。

較優(yōu)的，步驟3）所述反相色譜柱為AgilentZORBAXSB-C18色譜柱。

較優(yōu)的，步驟3）所述乙腈-水-磷酸系統(tǒng)中，流動(dòng)相A為乙腈，流動(dòng)相B為0.05v/v%磷酸溶液。

更優(yōu)的，步驟3）所述梯度洗脫程序以及流動(dòng)相的組成為：洗脫時(shí)間0~35min，磷酸溶液：乙腈=95:5，流速為1.0ml/min，洗脫時(shí)間35~55min，磷酸溶液：乙腈=85:15，流速為1.5ml/min，洗脫時(shí)間55~70min，磷酸溶液：乙腈=45:55，流速為0.7ml/min。

優(yōu)選的，步驟3）精密吸取供試品溶液或參照物溶液5～15ul，優(yōu)選10ul注入高效液相色譜儀，進(jìn)行測(cè)定。記錄60～90min，優(yōu)選70分鐘的色譜圖。

與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明由于對(duì)色譜條件進(jìn)行合理設(shè)置，使得本發(fā)明半合成藥物中間體的質(zhì)量檢測(cè)方法更為簡(jiǎn)便、易行、重復(fù)性好，通過(guò)HPLC指紋圖譜檢測(cè)半合成藥物中間體中總黃酮的含量，更利于其質(zhì)量控制，有助于提高藥劑的安全性和穩(wěn)定性。

具體實(shí)施方式

下面結(jié)合實(shí)施例進(jìn)一步闡述本發(fā)明。應(yīng)理解，實(shí)施例僅用于說(shuō)明本發(fā)明，而非限制本發(fā)明的范圍。

實(shí)施例1

1.儀器與試劑

儀器：Agilent1100型高效液相色譜儀，四元泵，全自動(dòng)進(jìn)樣儀；二極管陣列檢測(cè)

器（DAD）；色譜柱：AgilentZORBAXSB-C18StableBondAnalytical4.6*150mm5-Micron。

試藥：蘆丁；槲皮素；金絲桃苷；金銀花總黃酮

2.實(shí)驗(yàn)方法

樣品溶液的制備

1）供試品溶液的制備：取金銀花總黃酮0.5g，精密稱定，置25ml容量瓶中，加50%甲醇適量，超聲提取10min，冷卻后加50%甲醇定容至刻度，用