[發(fā)明專利]抗生素Indimicins A–E及其制備方法和在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201410214540.X
• 申請(qǐng)日: 2014-05-20
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN104031052A
• 公開(kāi)（公告）日: 2014-09-10
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張長(zhǎng)生;張文軍;馬亮;李蘇梅;張慶波;張海波;張光濤
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國(guó)科學(xué)院南海海洋研究所
• 主分類號(hào): C07D487/14
• 分類號(hào): C07D487/14;C07D403/14;C12P17/18;C12P17/16;A61K31/407;A61K31/404;A61P35/00;C12R1/465
• 代理公司: 廣州科粵專利商標(biāo)代理有限公司 44001
• 代理人: 劉明星

技術(shù)領(lǐng)域：

本發(fā)明屬于工業(yè)微生物領(lǐng)域，具體涉及新的抗生素Indimicins?A–E及其制備方法和在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。?

背景技術(shù)：

雙吲哚生物堿結(jié)構(gòu)多樣且具有多種生物、藥理活性。目前，一些雙吲哚生物堿的類似物作為蛋白激酶K的抑制劑或DNA拓?fù)洚悩?gòu)酶I的抑制劑已用于臨床試驗(yàn)(H.Nakano,and?S.Omura,′Chemical?Biology?of?Natural?Indolocarbazole?Products:30Years?since?the?Discovery?of?Staurosporine′,J?Antibiot,62(2009),17-26.)。?

發(fā)明內(nèi)容：

本發(fā)明的第一個(gè)目的是提供五種新的具有抗腫瘤活性的雙吲哚生物堿indimicins?A–E。?

本發(fā)明的五種新的雙吲哚生物堿indimicins?A–E，其結(jié)構(gòu)如式(I)所示：?

其中當(dāng)R₁＝CH₃,R₂＝H時(shí)，為Indimicins?A(1)；當(dāng)R₁＝CH₃,R₂＝CH₃時(shí)，為Indimicins?B(2)；當(dāng)R₁＝H,R₂＝CH₃時(shí)，為Indimicins?C(3)；當(dāng)R₁＝H,R₂＝H時(shí)，為Indimicins?D(4)；當(dāng)indimicin?A中，C-2′與C-2″間的碳碳單鍵斷開(kāi)時(shí)，為indimicin?E(5)。?

本發(fā)明的第二個(gè)目的是提供一種雙吲哚生物堿Indimicins?A–E的制備方法。?

本發(fā)明的Indimicins?A–E是從鏈霉菌(Streptomyces?sp.)SCSIO03032的發(fā)酵培養(yǎng)物中制備分離得到的。?

本發(fā)明優(yōu)選通過(guò)以下方法從鏈霉菌(Streptomyces?sp.)SCSIO03032的發(fā)酵培養(yǎng)物中制備得到Indimicins?A–E，具體步驟如下：?

a、制備鏈霉菌(Streptomyces?sp.)SCSIO03032的發(fā)酵培養(yǎng)物，將該發(fā)酵培養(yǎng)物的發(fā)酵液和菌絲體分離開(kāi)，發(fā)酵液經(jīng)大孔樹(shù)脂吸附，后用丙酮洗脫大孔樹(shù)脂，洗脫液回收丙酮后剩余的水混合液用乙酸乙酯萃取，乙酸乙酯層經(jīng)蒸餾濃縮后得到浸膏A；菌絲體先用丙酮浸提，浸取液回收丙酮后剩余的水混合液再用乙酸乙酯萃取，乙酸乙酯層經(jīng)蒸餾濃縮后得到浸膏B；?

b、將浸膏A和浸膏B合并的粗提物經(jīng)硅膠柱層析，用氯仿/甲醇作為洗脫劑，從體積比100：0～0：100進(jìn)行梯度洗脫，收集氯仿/甲醇體積比98:2梯度洗脫下來(lái)的餾分Fr.2，后經(jīng)ODS反相中壓液相色譜，用水/甲醇作為洗脫劑，從體積比100：0～0：100進(jìn)行梯度洗脫，收集水/甲醇體積比20：80梯度洗脫下來(lái)的餾分Fr.2-3，再過(guò)LH-20凝膠柱，以氯仿/甲醇體積比1:1作為流動(dòng)相洗脫，洗脫餾分再經(jīng)薄層層析純化分離，得到化合物indimicin?A、indimicin?B、indimicin?C、indimicin?D和indimicin?E。?

所述的a)步驟的制備鏈霉菌(Streptomyces?sp.)SCSIO03032的發(fā)酵培養(yǎng)物優(yōu)選通過(guò)以下方法制備：將活化的鏈霉菌(Streptomyces?sp.)SCSIO03032接入種子培養(yǎng)基，28℃，200rpm，培養(yǎng)48h得種子液，將種子液以10％的接種量接入到發(fā)酵培養(yǎng)基中，28℃，200rpm，振蕩培養(yǎng)120h，而制得發(fā)酵培養(yǎng)物，所述的種子培養(yǎng)基和發(fā)酵培養(yǎng)基的配方都為每升培養(yǎng)基中含有：淀粉10g，酵母粉5g，蛋白胨4g，CaCO₃2g，粗海鹽30g，余量為水，pH7.2。?

本發(fā)明的第三個(gè)目的是提供鏈霉菌(Streptomyces?sp.)SCSIO03032在制備化合物indimicin?A、indimicin?B、indimicin?C、indimicin?D或indimicin?E中的應(yīng)用。?