[發明專利]基于ADP檢測的發光磷酸轉移酶或ATP水解酶測定

無效

• 申請號: 201410211148.X
• 申請日: 2009-07-20
• 公開（公告）號: CN103983634A
• 公開（公告）日: 2014-08-13
• 發明（設計）人: S.A.格利;H.澤佐蒂
• 申請（專利權）人: 普羅美加公司
• 主分類號: G01N21/76
• 分類號: G01N21/76
• 代理公司: 中國專利代理(香港)有限公司 72001
• 代理人: 林毅斌;權陸軍

1.?用于檢測溶液中腺苷二磷酸(ADP)的存在與否或測定其含量的方法，所述方法包括：

(a)?使用將ATP轉化為非ADP產物的酶，基本上將溶液中的所有ATP減少成非ADP產物；

(b)?使用能夠將ADP轉化為ATP和磷酸基團供體的酶，將溶液中的ADP轉化為ATP；和

(c)?采用生物發光反應，檢測(a)中所產生的ATP的存在與否或測定其含量。

2.?權利要求1的方法，所述方法還包括：

(d)?在(b)或(c)之前，基本上除去(a)中產生的所有焦磷酸(PPi)。

3.?權利要求1或2的方法，所述方法還包括：

(e)?在(b)或(c)之前，抑制將ATP轉化為非ADP產物的酶。

4.?權利要求1-3中任一項的方法，其中通過產生ADP的酶在溶液中產生ADP，而且所述生物發光反應提供對產生ADP的酶的度量。

5.?權利要求4的方法，其中所述產生ADP的酶是將ATP轉化為ADP的酶。

6.?權利要求5的方法，其中所述將ATP轉化為ADP的酶是激酶或ATP水解酶。

7.?權利要求6的方法，所述方法還包括：

(f)?在(a)之前，在激酶反應或ATP水解酶反應的已知或推定抑制劑的存在或不存在下，進行所述激酶反應或ATP水解酶反應。

8.?權利要求1-7中任一項的方法，其中所述將ATP轉化為非ADP產物的酶是腺苷酸環化酶。

9.?權利要求1-8中任一項的方法，其中所述能夠將ADP轉化為ATP的酶是丙酮酸激酶。

10.?權利要求1-9中任一項的方法，其中所述生物發光反應包含螢光素酶和所述螢光素酶的底物。

11.?權利要求2-10中任一項的方法，其中(d)用焦磷酸酶來進行。

12.?用于檢測溶液中的ADP的試劑盒，所述試劑盒包含：

(i)?將ATP轉化為非ADP產物的酶；

(ii)?能夠將ADP轉化為ATP的酶；

(iii)?磷酸基團供體；

(iv)?螢光素酶；和

(v)?所述螢光素酶的底物。

13.?權利要求12的試劑盒，所述試劑盒還包含一種或多種以下成分：(vi)?焦磷酸酶；

(vii)?一種或多種去垢劑；

(viii)?一種或多種緩沖液；和/或

(ix)?一種或多種鹽。

14.?權利要求12或13的試劑盒，其中所述將ATP轉化為非ADP產物的酶是腺苷酸環化酶，所述能夠將ADP轉化為ATP的酶是丙酮酸激酶和/或所述磷酸基團供體是磷酸烯醇式丙酮酸。