[發(fā)明專利]菊花花枯病菌實時熒光PCR檢測方法有效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201410210430.6 | 申請日： | 2014-05-19 |
| 公開（公告）號： | CN103952492A | 公開（公告）日： | 2014-07-30 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 陳吳健;張明哲;林曉佳;吳志毅;陳曦 | 申請（專利權(quán)）人： | 浙江省檢驗檢疫科學(xué)技術(shù)研究院 |
| 主分類號： | C12Q1/68 | 分類號： | C12Q1/68;C12Q1/04 |
| 代理公司： | 杭州中成專利事務(wù)所有限公司 33212 | 代理人： | 金祺 |
| 地址： | 310016 浙*** | 國省代碼： | 浙江;33 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 菊花 病菌 實時 熒光 pcr 檢測 方法 | ||
1.菊花花枯病菌實時熒光PCR檢測方法，其特征是：
以待測樣品DNA為模板，利用上游引物DL1、下游引物DL2和熒光探針Probe-DL進行PCR擴增，若發(fā)生特異性擴增，則表明待測樣品中帶有菊花花枯病菌D.ligulicola；
所述上游引物DL1為：5，-CAACACTTAAACCCTTTGTAATTGA-3，
所述下游引物DL2為：5，-GGACGTCGTCGTTTTGTTGT-3，；
所述熒光探針Probe-DL為：5，-FAM-ACAACTTTCAACAACGGATC-TAMRA-3，。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的菊花花枯病菌實時熒光PCR檢測方法，其特征是：
所述PCR擴增的反應(yīng)體系(20μL)為：
所述PCR擴增的反應(yīng)條件為：
50℃預(yù)熱2min，95℃變性10min；然后進入40個循環(huán)，95℃15s，60℃1min。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的菊花花枯病菌實時熒光PCR檢測方法，其特征是：PCR擴增擴增后讀取Ct值，當(dāng)Ct值為小于或等于36時，判定為發(fā)生特異性擴增，即表明待測樣品中帶有菊花花枯病菌D.ligulicola。
4.根據(jù)權(quán)利要求1、2或3所述的菊花花枯病菌實時熒光PCR檢測方法，其特征是：所述待測樣品為菊花及菊花產(chǎn)品。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的菊花花枯病菌實時熒光PCR檢測方法，其特征是：所述菊花產(chǎn)品為菊花切花、菊花切條、干制菊花茶。
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