[發明專利]用于哺乳動物細胞中RNA干擾的沙門氏菌菌株、其制備方法及應用

有效

• 申請號: 201410209851.7
• 申請日: 2014-05-16
• 公開（公告）號: CN105087418B
• 公開（公告）日: 2018-04-03
• 發明（設計）人: 華子春;程俠為;張曉昕
• 申請（專利權）人: 江蘇靶標生物醫藥研究所有限公司;常州南京大學高新技術研究院
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N15/09;A61K35/74;A61K48/00;A61P35/00;C12R1/42
• 代理公司: 常州佰業騰飛專利代理事務所(普通合伙)32231
• 代理人: 黃杭飛

1.一種沙門氏菌菌株的制備方法，其特征在于：擴增2個末端含有擬敲除基因同源重組序列、中間含有抗生素基因的PCR產物片段，轉入擬敲除的沙門氏菌中，通過RedA基因重組系統取代擬敲除基因的編碼序列，經過抗生素篩選、PCR反應鑒定獲得突變菌株，經過多輪重復上述基因敲除過程，最終獲得含有purI、msbB、phoP、phoQ基因敲除的沙門氏菌突變菌株。

2.一種沙門氏菌菌株的制備方法，其特征在于：擴增2個末端含有擬敲除基因同源重組序列、中間含有抗生素基因的PCR產物片段，將PCR產物片段克隆在pKD46質粒中，轉入擬敲除的沙門氏菌中，通過RedA基因重組系統取代擬敲除基因的編碼序列，經過抗生素篩選、PCR反應鑒定獲得突變菌株，經過多輪重復上述基因敲除過程，最終獲得含有purI、msbB、phoP、phoQ基因敲除的沙門氏菌突變菌株。

3.一種含有權利要求1或2中所述方法制備的沙門氏菌菌株的藥物。

4.如權利要求1或2中所述方法制備的沙門氏菌菌株在制備抗有乏氧區的腫瘤藥物中的應用。

5.如權利要求1或2中所述方法制備的沙門氏菌菌株在制備基因治療藥物中的應用。

6.如權利要求1或2中所述方法制備的沙門氏菌菌株在制備RNA干擾藥物中的應用。

7.如權利要求1或2中所述方法制備的沙門氏菌菌株在制備具有RNA干擾或/和基因治療性能的藥物中的應用。

8.如權利要求1或2中所述方法制備的沙門氏菌菌株在制備具有RNA干擾或/和基因治療性能的抗有乏氧區的腫瘤藥物中的應用。

9.如權利要求1或2中所述方法制備的沙門氏菌菌株在制備具有RNA干擾或/和基因治療性能的抗乳腺癌藥物中的應用。

10.如權利要求1或2中所述方法制備的沙門氏菌菌株在制備抗有乏氧區的腫瘤藥物中的應用，其特征在于：所述藥物與化療中紫杉醇或順鉑、放療、生物治療中的抗體藥物、恩度或者TRAIL、中藥治療藥物中的雷公藤多甙或者冬凌草甲素的聯合應用。

11.如權利要求1或2中所述方法制備的沙門氏菌菌株在制備具有RNA干擾或/和基因治療性能的抗有乏氧區的腫瘤藥物中的應用，其特征在于：所述藥物與化療中紫杉醇或順鉑、放療、生物治療中的抗體藥物、恩度或者TRAIL、中藥治療藥物中的雷公藤多甙或者冬凌草甲素的聯合應用。