[發明專利]一種制備艾替班特的方法

有效

• 申請號: 201410209368.9
• 申請日: 2014-06-27
• 公開（公告）號: CN103992383B
• 公開（公告）日: 2017-05-17
• 發明（設計）人: 何南海;葉曉峰;林曉峰;楊東暉;路楊;程麗
• 申請（專利權）人: 杭州阿諾生物醫藥科技股份有限公司
• 主分類號: C07K7/06
• 分類號: C07K7/06;C07K1/06;C07K1/04;C07K1/02
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及一種多肽類藥物的制備方法，是一種合成具有選擇性抑制緩激肽與B2受體結合以治療遺傳性血管水腫治療特效藥-艾替班特的制備方法。

背景技術

艾替班特，英名為：Icatibant，是含有5個非蛋白源氨基酸的十肽，結構式如下：

肽序列為：

H-D-Arg-Arg-Pro-Hyp-Gly-Thi-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH

遺傳性血管水腫（hereditary angioedema, HAE）又稱C1抑制物缺乏癥，是一種罕見的由遺傳缺陷引起的常染色體顯性遺傳病，發病率為1/50000~1/10000。HAE其特征是不可預知的手、腳、臉、喉頭和腹部的發作性水腫和腫脹，導致毀容、失能或死亡。病人通常有該病的家族史，HAE病人可出現手、足、四肢、面部、腸道、喉頭或氣管的快速水腫，這可能使呼吸道水腫而導致病人有窒息的危險。

艾替班特是由Shire公司研發的HEA專治藥物，2008年11月7日，本品以商品名Firazyr首先被EMEA批準為孤兒藥用于治療成人遺傳性血管水腫（HAE）的急性發作，2011年8月25日獲得美國FDA批準，是FDA批準的第三個治療HAE急性發作的藥物。

艾替班特是一種對緩激肽B2受體選擇性的競爭性拮抗劑，親和力與緩激肽相似。遺傳性血管水腫是C1-酯酶-抑制劑的缺乏或功能失調所致，緩激肽是一種血管擴張劑，被認為負責局部化腫脹、炎癥、和疼痛等HAE特征性癥狀。艾替班特通過抑制緩激肽與B2受體結合以治療HAE急性發作臨床癥狀。除此之外，他還有潛在的治療適應癥如哮喘、肝硬化和其他類型的血管性水腫。

然而現有的艾替班特的制備方法主要有，由德國赫切斯特股份公司1988年發明的固相合成方法和CN201210028377.9公開了的制備方法，具體步驟為：通過Fmoc固相合成法，以CTC-樹脂為起始樹脂，按照艾替班特主鏈肽序依次偶聯具有N端Fmoc保護且側鏈保護的氨基酸，裂解后得到產品。由于最后兩個偶聯的氨基酸都是精氨酸，側鏈保護基團為大分子的疏水性基團，因此導致精氨酸偶聯不完全，生成缺失肽雜質：des-D-Arg¹-艾替班特和des-Arg²-艾替班特。

有關雜質des-D-Arg¹-艾替班特和des-Arg²-艾替班特的氨基酸序列分別如下：

des-D-Arg¹-艾替班特：H-Arg-Pro-Hyp-Gly-Thi-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH

des-Arg²-艾替班特：H-D-Arg-Pro-Hyp-Gly-Thi-Ser-D-Tic-Oic-Arg-OH

這兩個雜質都是毒性較大的雜質之一，且與主峰分離十分困難，該雜質的存在嚴重影響艾替班特含量以及使用安全。因此需要找到有效的方法將其去除并使其達到優質標準級別0.1%以下。本發明人研究發現，該雜質用現有技術的手段很難除去，有些方法雖可以去除部分，但去除效果不理想，難以達到優質標準級別同時容易造成艾替班特本身收率降低。

綜上所述，現有艾替班特的固相合成過程中，由于合成收率低，雜質多，特別是都不能很好控制雜質des-D-Arg¹-艾替班特和des-Arg²-艾替班特，不適用于工業化生產。

發明內容

本發明人用現有的合成方法，制備艾替班特，發現現有技術存在的技術問題是：合成收率低，雜質多，特別是都不能很好控制雜質des-D-Arg¹-艾替班特和des-Arg²-艾替班特，不適于工業化規模生產。為此，本發明人對艾替班特的合成方法進行了研究，從而得到了本發明的技術方案。

本發明的目的是提供一種艾替班特的固相合成方法。本發明的合成路線如圖1所示：首先通過液相方法合成片段Boc-D-Arg-Arg-OH.2HCl；其次通過固相合成法，以王樹脂為起始樹脂，按照艾替班特主鏈肽序依次偶聯具有N端Fmoc保護且側鏈保護的氨基酸，其中最后兩個氨基酸采用片段Boc-D-Arg-Arg-OH.2HCl偶聯，肽樹脂裂解、純化、脫鹽、凍干后可以得到艾替班特，其缺失肽雜質des-D-Arg¹-艾替班特和des-Arg²-艾替班特含量都小于0.1%。

本發明中一些常用的縮寫具有以下含義；

Fmoc ：芴甲氧羰基