[發(fā)明專利]C-BF保護小鼠及人結(jié)腸癌上皮細(xì)胞系潰瘍性結(jié)腸炎綜合模型

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201410208089.0
• 申請日: 2014-05-16
• 公開（公告）號: CN104046592A
• 公開（公告）日: 2014-09-17
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 汪以真;張海文;戎亦驪
• 申請（專利權(quán)）人: 浙江大學(xué)
• 主分類號: C12N5/09
• 分類號: C12N5/09;A01K67/027;A61D7/00
• 代理公司: 杭州求是專利事務(wù)所有限公司 33200
• 代理人: 林松海

1.一種抗菌肽C-BF保護小鼠及人結(jié)腸癌上皮細(xì)胞系潰瘍性結(jié)腸炎綜合模型，其特征在于，

1）對于小鼠，建立3%葡聚糖硫酸鈉（DSS）誘導(dǎo)小鼠潰瘍性結(jié)腸炎模型；小鼠直腸注射C-BF的PBS溶液，每天一次，C-BF的劑量是5mg／kg，注射持續(xù)1周，實驗期每天稱重記錄體重數(shù)據(jù)，并觀察小鼠直腸出血，糞便成型情況；

2）對于Caco-2細(xì)胞，培養(yǎng)基中抗菌肽C-BF的濃度為25ug/ml，抗菌肽處理Caco-2細(xì)胞24h后用3%DSS處理24h。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的抗菌肽C-BF保護小鼠及人結(jié)腸癌上皮細(xì)胞系潰瘍性結(jié)腸炎綜合模型，其特征在于，進一步，

3）對于小鼠，熒光標(biāo)記C-BF，濃度為2mg/ml，直腸注射，通過活體成像、HE染色、免疫熒光、免疫組織化學(xué)、流式細(xì)胞儀、Tunnel、ELISA、利用細(xì)胞電阻儀對跨上皮電阻值進行測定、western-blot、實時熒光定量PCR技術(shù)方法；

4）對于Caco-2細(xì)胞，利用細(xì)胞電阻儀對跨上皮電阻值進行測定，Western-blot、實時熒光定量PCR技術(shù)方法；

5）綜合體內(nèi)小鼠實驗和體外細(xì)胞實驗，評價C-BF在緩解炎癥、降低細(xì)胞凋亡水平以及改善腸道屏障功能的作用。