[發明專利]一種米根霉與皺褶假絲酵母偶聯生產L-蘋果酸的方法在審
| 申請號： | 201410204551.X | 申請日： | 2014-05-14 |
| 公開（公告）號： | CN103966301A | 公開（公告）日： | 2014-08-06 |
| 發明（設計）人： | 李鑫;顧夕梅;勇強;余世袁;歐陽嘉;徐勇;朱均均;周瑾;奚曉桐;沈怡 | 申請（專利權）人： | 南京林業大學 |
| 主分類號： | C12P39/00 | 分類號： | C12P39/00;C12P7/46;C12R1/845;C12R1/72 |
| 代理公司： | 南京蘇高專利商標事務所(普通合伙) 32204 | 代理人： | 肖明芳 |
| 地址： | 210037 *** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 米根霉 皺褶 酵母 生產 蘋果酸 方法 | ||
【權利要求書】：
1.一種米根霉與皺褶假絲酵母偶聯生產L-蘋果酸的方法，其特征在于，它包括如下步驟：
(1)皺褶假絲酵母經種子培養后，再經擴大培養，過濾回收菌體備用；其中，所述的擴大培養，先在33℃下發酵培養48h，再在35℃下繼續發酵培養48h；
(2)米根霉經種子培養形成孢子懸濁液，再經發酵基礎培養直至形成顆粒狀菌體；
(3)將經過步驟(2)發酵基礎培養后的米根霉接種于發酵培養基中，以碳酸鈉控制pH值4.0～5.0，35℃下發酵生產富馬酸和L-蘋果酸，發酵48～60h后，用氨水調節pH值至7.5～8.0，再接入步驟(1)得到的皺褶假絲酵母，維持35℃，與米根霉共培養至全部富馬酸轉化為L-蘋果酸。
2.根據權利要求1所述的米根霉與皺褶假絲酵母偶聯生產L-蘋果酸的方法，其特征在于，步驟(1)中，所述的皺褶假絲酵母經種子培養和擴大培養后，菌體密度為30g濕菌體/L以上。
3.根據權利要求1所述的米根霉與皺褶假絲酵母偶聯生產L-蘋果酸的方法，其特征在于，步驟(2)中，形成顆粒狀菌體，顆粒直徑0.5～2mm。
4.根據權利要求1所述的米根霉與皺褶假絲酵母偶聯生產L-蘋果酸的方法，其特征在于，步驟(3)中，所述的發酵培養基，碳源為纖維素水解葡萄糖。
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