[發(fā)明專利]一種篩查子宮內(nèi)膜癌易感基因的無創(chuàng)檢測試劑盒無效
| 申請?zhí)枺?/td> | 201410203973.5 | 申請日： | 2014-05-15 |
| 公開（公告）號： | CN104450876A | 公開（公告）日： | 2015-03-25 |
| 發(fā)明（設(shè)計）人： | 郭文強;李成;楊華為;李珍;張弓;寧慧青 | 申請（專利權(quán)）人： | 太原深度解碼基因科技有限公司 |
| 主分類號： | C12Q1/68 | 分類號： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 暫無信息 | 代理人： | 暫無信息 |
| 地址： | 030006 山西省太*** | 國省代碼： | 山西;14 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 子宮 內(nèi)膜 癌易感 基因 檢測 試劑盒 | ||
1.一種篩查子宮內(nèi)膜癌易感基因的無創(chuàng)檢測試劑盒，包括：檢測單核苷酸多態(tài)性位點基因型的特異性引物與DNA測序引物、PCR反應組件、PCR產(chǎn)物純化組件和DNA測序反應組件，所述PCR反應組件包括Taq酶、dNTP混合液、反應緩沖液、ddH2O，所述PCR產(chǎn)物純化組件包括SAP酶、ExoI酶、ddH2O，所述DNA測序反應組件包括BigDye?mix，EDTA溶液、100％乙醇溶液、70％乙醇溶液、HIDI溶液、ddH2O，其特征在于：所述特異性引物是針對CYP1A1基因上單核苷酸多態(tài)性位點Msp?I、CYP1B1基因上單核苷酸多態(tài)性位點Leu432Val、CYP17基因上單核苷酸多態(tài)性位點MspA1I、MDM2基因上單核苷酸多態(tài)性位點309和NQ01基因上單核苷酸多態(tài)性位點C609T，能特異性擴增出包含5個SNPs位點的DNA片段的引物對。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種篩查子宮內(nèi)膜癌易感基因的無創(chuàng)檢測試劑盒，其特征在于：所述DNA測序引物是針對CYP1A1基因上單核苷酸多態(tài)性位點Msp?I、CYP1B1基因上單核苷酸多態(tài)性位點Leu432Val、CYP17基因上單核苷酸多態(tài)性位點MspA1I、MDM2基因上單核苷酸多態(tài)性位點309和NQ01基因上單核苷酸多態(tài)性位點C609T，能通過DNA測序技術(shù)特異性檢測出上述5個SNPs位點基因型的DNA測序引物。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種篩查子宮內(nèi)膜癌易感基因的無創(chuàng)檢測試劑盒，其特征在于：所含的五對特異性引物序列如下：
1)CYP1A1Msp?I正向引物：5’GGGAGGAAGAAGAGGAGGTAG3’
CYP1A1Msp?I反向引物：5’AGGTTCTTGAAAGCAGGGACT3’
2)CYP1B1Leu432Val正向引物：5’TTGTGCCTGTCACTATTCCTCA3’
CYP1B1Leu432Val反向引物：5’AGCCAGGATGGAGATGAAGAG3’
3)CYP17MspA1I正向引物：5’CCCATACGAACCGAATAGA3’
CYP17MspA1I反向引物：5’AGTCAAGGTGAAGATCAGGGTAG3’
4)MDM2SNP309正向引物：5’CGGGAGTTCAGGGTAAAGGT3’
MDM2SNP309反向引物：5’AGCAAGTCGGTGCTTACCTG3’
5)NQ01C609T正向引物：5’TGGCACAGTTTCAAGGTTTATG3’
NQ01C609T反向引物：5’TATTCTCCAGGCGTTTCTTCC3’。
4.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的一種篩查子宮內(nèi)膜癌易感基因的無創(chuàng)檢測試劑盒，其特征在于：所含的五條DNA測序引物序列如下：
1)CYP1A1Msp?I測序引物：5’GGGAGGAAGAAGAGGAGGTAG3’
2)CYP1B1Leu432Val測序引物：5’TTGTGCCTGTCACTATTCCTCA3’
3)CYP17MspA1I測序引物：5’CCCATACGAACCGAATAGA3’
4)MDM2SNP309測序引物：5’CGGGAGTTCAGGGTAAAGGT3’
5)NQ01C609T測序引物：5’TATTCTCCAGGCGTTTCTTCC3’。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種篩查子宮內(nèi)膜癌易感基因的無創(chuàng)檢測試劑盒，其特征在于：試劑盒的組分和含量包括：
1)PCR反應體系：10×PCR反應緩沖液2.5ul，25mM?dNTP混合液0.2ul，5U/ul?Taq?DNA聚合酶0.125ul，20uM特異性引物對，每條引物各0.25ul，ddH2O19.175ul；
2)PCR產(chǎn)物純化體系：1U/ul?SAP酶0.75ul，10U/ul?ExoI酶0.375ul，ddH2O3.875ul；
3)測序反應體系：25％BigDye?mix1ul，3.2uM?DNA測序引物1ul，125mM?EDTA溶液1ul，100％乙醇溶液15ul，70％乙醇溶液30ul，HIDI溶液8ul，ddH2O2ul；
本試劑盒供一人份檢測應用，試劑盒的保存溫度為-20℃。
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