[發(fā)明專利]利用4個蛋白聯(lián)合預測食道癌患者預后的試劑盒

有效

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• 申請日: 2014-05-09
• 公開（公告）號: CN104034902A
• 公開（公告）日: 2014-09-10
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 張俊毅;白玉勤;瑞云;董彩鳳;許秀娥;吳健誼;許麗艷;李恩民
• 申請（專利權(quán)）人: 赤峰學院;汕頭大學醫(yī)學院
• 主分類號: G01N33/68
• 分類號: G01N33/68;G01N33/574
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及聯(lián)合多個蛋白抗體并利用免疫組織化學超敏型二步法去檢測食道癌患者標本的表達情況進而預測患者預后的試劑盒。

背景技術(shù)

食道鱗狀細胞癌(Esophageal?Squamous?Cell?Carcinoma，ESCC)在我國是一種常見的上消化道惡性腫瘤，在國人的惡性腫瘤死亡率中位居第四位。全世界每年40余萬的新發(fā)食道癌病例中，一半以上發(fā)生在我國，我國也是世界上公認的食道癌第一高發(fā)國。上世紀70年代，在全國范圍內(nèi)實施了惡性腫瘤普查，確立河北磁縣、河南林縣、山西陽泉、四川鹽亭、廣東潮汕和江蘇淮安等地區(qū)為中國食道癌六大高發(fā)區(qū)。

準確預測食道癌患者的預后對于臨床進一步的治療和隨訪具有重要意義。然而，目前除了國際TNM分期外還沒有一種簡便有效的方法可以更加準確地預測食道癌患者的預后。然而，TNM分期預測患者的預后比較繁瑣，需要準確地評價腫瘤的浸潤深度、轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)的個數(shù)、腫瘤有無遠處轉(zhuǎn)移等，況且國際TNM分期的制定缺少大量國人食道癌的病例資料，因此在評價我國患者的預后時適用性比較差，而本發(fā)明所采用的4個指標聯(lián)合預測患者預后的試劑盒比單個指標檢測具有更高的預測效果，同時也明顯高于TNM分期的預測能力，并且本發(fā)明所基于的免疫組織化學超敏型二步法是一種成熟可靠、可在基層醫(yī)院廣泛使用的方法。本試劑盒中4種抗體蛋白的背景介紹如下。

δ-catenin蛋白作為黏附分子Catenin家族中的一員，除了在神經(jīng)元突觸處發(fā)揮重要的生理作用外，其在腫瘤演進過程中所發(fā)揮的作用也越來越受到人們的關(guān)注。最近的文獻也報道了δ-catenin在肺癌、前列腺癌、大腦星形細胞瘤及卵巢癌中的表達明顯增高且和患者的不良預后密切相關(guān)。然而，在國人惡性腫瘤死亡率居第四位的食道癌中δ-catenin的表達情況如何及其與患者預后的關(guān)系尚不清楚。本發(fā)明的前期研究發(fā)現(xiàn)δ-catenin在食道癌組織中高表達并與患者的不良預后密切相關(guān)。

Dynamin-2蛋白主要定位在細胞連接處，并參與細胞偽足的形成。在子宮頸鱗狀細胞癌中Dynamin-2的表達增加。本發(fā)明的前期研究發(fā)現(xiàn)Dynamin-2在食道癌組織中的表達與患者的不良預后密切相關(guān)。

Erbin蛋白定位在細胞連接半橋粒處，在皮膚鱗狀細胞癌中Erbin的表達增加。本發(fā)明的前期研究發(fā)現(xiàn)Erbin在食道癌組織中高表達并與患者的不良預后密切相關(guān)。

LAP-1蛋白也定位在細胞連接處，特別是神經(jīng)元突觸膜上。該蛋白在腫瘤組織中表達的研究甚少。本發(fā)明的前期研究發(fā)現(xiàn)LAP-1在食道癌組織中的表達與患者的不良預后密切相關(guān)。

雖然上述每種蛋白均具有預測食道癌患者預后的能力，但把4種蛋白聯(lián)合起來預測食道癌患者的預后則具有更強的判斷效能，甚至高于國際公認的TNM分期的預測能力。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種基于免疫組織化學方法的4個蛋白抗體聯(lián)合預測食道癌患者預后的試劑盒。

其中，上述的免疫組織化學方法主要是檢測中性福爾馬林固定和石蠟包埋的標本。

其中，上述試劑盒主要包括4種蛋白抗體，分別是δ-catenin、Dynamin-2、Erbin和LAP-1抗體。

其中，上述試劑盒還包括：山羊血清，0.01M檸檬酸鹽修復液，3％H₂O₂，Polymer增強劑，Polymer聚合物，DAB顯色試劑，PBS溶液。

附圖說明

圖1是δ-catenin蛋白在不同表達人群的Kaplan-Meier生存曲線(X²＝6.671，P＝0.010)。

圖2是Dynamin-2蛋白在不同表達人群的Kaplan-Meier生存曲線(X²＝5.181，P＝0.023)。

圖3是Erbin蛋白在不同表達人群的Kaplan-Meier生存曲線(X²＝4.633，P＝0.031.)。

圖4是LAP-1蛋白在不同表達人群的Kaplan-Meier生存曲線(X²＝8.546，P＝0.003)。

圖5是4種蛋白聯(lián)合后判斷該人群的Kaplan-Meier生存曲線(X²＝18.574，P<0.001.)。