[發(fā)明專利]雞新城疫糖蛋白病毒抗原的制備方法及其產(chǎn)品

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201410196203.2
• 申請日: 2014-05-09
• 公開（公告）號: CN104059927B
• 公開（公告）日: 2018-01-09
• 發(fā)明（設計）人: 張志芳;李軼女;王智權;易詠竹;李浩洋;李田田;胡小元
• 申請（專利權）人: 中國農業(yè)科學院生物技術研究所
• 主分類號: C12N15/45
• 分類號: C12N15/45;C12N15/56;C12N15/866;C12N9/24;C12N7/01;C07K14/125;A61K39/17;A61P31/14
• 代理公司: 北京思元知識產(chǎn)權代理事務所(普通合伙)11598
• 代理人: 余光軍

1.一種雞新城疫病毒抗原基因家蠶桿狀病毒呈遞載體的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)將SEQ ID NO.5所示的經(jīng)優(yōu)化的雞新城疫病毒糖蛋白基因F-O與哺乳動物細胞啟動子一起克隆到桿狀病毒運載載體中，構建得到轉移表達載體；或者將SEQ ID NO.5所示的經(jīng)優(yōu)化的雞新城疫病毒糖蛋白基因F-O與優(yōu)化后的雞新城疫病毒血凝素神經(jīng)氨酸酶基因HN-O串聯(lián)在一起的序列與哺乳動物細胞啟動子一起克隆到桿狀病毒運載載體中，構建得到轉移表達載體，其中，所述雞新城疫病毒血凝素神經(jīng)氨酸酶基因HN的核苷酸序列為SEQ ID NO.3所示，SEQ ID NO.5所示的經(jīng)優(yōu)化的雞新城疫病毒的糖蛋白基因F-O與優(yōu)化后的雞新城疫病毒血凝素神經(jīng)氨酸酶基因HN-O串聯(lián)在一起的序列為SEQ ID NO.9所示；所述的哺乳動物細胞啟動子為CAG啟動子；

(2)將構建得到的轉移表達載體與桿狀病毒DNA共轉染昆蟲細胞獲得重組桿狀病毒；

(3)將重組桿狀病毒感染昆蟲宿主，擴增重組桿狀病毒，即得。

2.按照權利要求1所述的制備方法，其特征在于：所述的桿狀病毒運載載體為pVL1393；

所述的桿狀病毒為BmNPV；

所述的昆蟲宿主為家蠶；

所述的感染為將重組家蠶桿狀病毒感染家蠶細胞或穿刺接種1-5齡的家蠶幼蟲或蛹體，在感染3-6天后收集含各種抗原的家蠶幼蟲或蛹的體液或組織勻漿或在昆蟲體內繁殖的重組病毒。

3.按照權利要求2所述的制備方法，其特征在于：所述的蛹體為1-2天的早期嫩蛹。