[發明專利]一種試劑及其在二價銅離子檢測中的應用

無效

• 申請號: 201410194130.3
• 申請日: 2014-05-08
• 公開（公告）號: CN103980189A
• 公開（公告）日: 2014-08-13
• 發明（設計）人: 陰彩霞;霍方俊
• 申請（專利權）人: 山西大學
• 主分類號: C07D213/66
• 分類號: C07D213/66;G01N21/64
• 代理公司: 山西五維專利事務所(有限公司) 14105
• 代理人: 張福增

1.一種試劑：它是吡哆醛肼,其特征在于結構式為：

2.如權利要求1所述的一種試劑的合成方法，其特征在于步驟為：吡哆醛鹽酸和過量的水合肼在乙醇中回流8小時，冷卻后過濾，再用乙醇和水重結晶得到白色的固體。

3.一種檢測二價銅離子的方法：其特征在于，步驟為：

(1)、配制pH＝7.4、濃度為10mM的HEPES緩沖溶液，配制2mM的吡哆醛肼甲醇溶液；

(2)、按體積比5:5:1，將HEPES緩沖溶液、甲醇溶液和吡哆醛肼的甲醇溶液加到干凈的熒光比色皿中，在熒光分光光度儀上檢測，隨著待測樣的加入,455nm的熒光強度逐漸減弱；

(3)、用蒸餾水配制2mM的Cu²⁺溶液，把1mL的HEPES緩沖溶液、1mL的甲醇溶液、200μL的吡哆醛甲醇溶液加到另一個熒光比色皿中，分別在加入二價銅離子溶液的體積為10、20、30、40、50、60、70、80μL時，在熒光分光光度儀上測定455nm對應的熒光強度F為177、153、131、110、88、63、42、17，以Cu²⁺濃度為橫坐標，以相對熒光強度F₀－F為縱坐標繪制圖，F₀﹦201，得到Cu²⁺濃度的工作曲線；線性回歸方程為：F₀－F＝3.28+2.23c，c的單位為μM；

(4)、將HEPES緩沖溶液1000uL、甲醇溶液1000uL和吡哆醛肼甲醇溶液200uL加到干凈的熒光比色皿中，用微量進樣器吸取VμL待測樣品溶液，加入到此干凈的熒光比色皿中，在熒光分光光度儀上檢測，將測得的熒光強度代入步驟(3)的線性回歸方程，得到濃度c，待測樣品C_待測樣＝(2200+V_待測樣)μL×c×10^-6/VμL,即可求得Cu²⁺的濃度。