[發明專利]一種從蛹蟲草中提取蟲草素的方法

有效

• 申請號: 201410190548.7
• 申請日: 2014-05-08
• 公開（公告）號: CN104072559A
• 公開（公告）日: 2014-10-01
• 發明（設計）人: 劉安球;程倩;劉高潔;牛國成;李文龍;曲海明
• 申請（專利權）人: 寧波廣發文博生物科技有限公司
• 主分類號: C07H19/16
• 分類號: C07H19/16;C07H1/08
• 代理公司: 杭州杭誠專利事務所有限公司 33109
• 代理人: 尉偉敏

技術領域

本發明涉及一種蟲草素提取方法，尤其是涉及一種從蛹蟲草中提取蟲草素的方法。

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背景技術

蛹蟲草又名北冬蟲夏草，與我國名貴中藥材冬蟲夏草為同屬異種，屬于真菌界子囊菌門麥角菌科蟲草屬，其藥用活性成分主要為蟲草素。由于受原料、純化過程等因素的影響，其價格一直居高不下，高昂的價格已經成為制約蟲草素開發利用的瓶頸。因此研究蟲草素的提取工藝和提高其得率具有重要的經濟價值和廣闊的市場應用潛力。

公開號CN101508715A，公開日為2009年8月19日的中國專利公開了一種蛹蟲草中蟲草素提取純化方法，包括：將蛹蟲草原料粉碎后以料水比1∶20比例加水混合，進行超聲波提取，將提取液離心過濾上大孔樹脂柱，吸附流速1.8BV/HR；以15%甲醇水溶液為洗脫劑洗脫樹脂柱，用旋轉蒸發器在溫度60℃下減壓濃縮洗脫液，制得蛹蟲草蟲草素濃縮物。其不足之處在于：（1）超聲提取溫度為60℃，且在常壓下進行，能耗高，且不利于蟲草素的溶出，還易造成蟲草素在水中的降解；（2）只通過大孔樹脂柱進行純化，純化效果差；（3）對得到的低濃度溶液（即洗脫液）直接采用旋轉蒸發的方式濃縮，不僅操作時間長，效率低，且能耗非常大。

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發明內容

本發明是為了解決現有技術的蟲草素提取方法能耗高，操作時間長，提取效率低，得到的蟲草素純度低的問題，提供了一種從蛹蟲草中提取蟲草素的方法，對蟲草素的提取和純化工藝進行了優化，工藝步驟與選用的設備簡單，可操作性強，能耗低，適合大規模工業化生產，蟲草素的得率與純度高，為蟲草素產業化生產提供了技術依據。

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為了實現上述目的，本發明采用以下技術方案：

一種從蛹蟲草中提取蟲草素的方法，包括以下步驟：

（1）將干燥的提取原料粉碎后，加水并在真空條件下至少超聲提取二次，合并提取液。本發明在真空條件下進行超聲水提，相對于常規的在常壓下進行超聲水提，真空超聲水提更有利于蟲草素的溶出。

（2）將步驟（1）中的提取液粗濾后，通過732型陽離子樹脂，得第一流出液。提取液通過732型陽離子樹脂以進行第一次脫雜，此時蟲草素不交換，而無關的有機或無機陰陽離子以及糖類、脂類等雜質被吸附。

（3）對第一流出液進行靜置沉降并收集上清液，將上清液再通過732型陽離子樹脂，得第二流出液。上清液再通過732型陽離子樹脂，同樣的，此時蟲草素不交換，以進一步去除有機或無機陰陽離子以及糖類、脂類等雜質，通過二次反吸附的初步分離，以減少雜質成分對后續步驟的干擾，提高蟲草素的純度。

（4）將第二流出液通過微孔濾膜進行精濾，得精濾液。

（5）對精濾液進行反滲透濃縮，得第一濃縮液。傳統的濃縮為蒸餾濃縮（含有乙醇時同時對乙醇進行回收），蒸餾溫度一般在60℃以上，溫度高，不僅能耗高，效率低，而且易造成水溶液中的蟲草素發生降解，導致最后得到的蟲草素純度下降，而本發明放棄傳統的蒸餾濃縮，采用反滲透濃縮，不僅操作更為簡單，分離效率高，能耗大大降低（在室溫下進行即可），而且蟲草素不會降解。

（6）將第一濃縮液pH調節為3~4后加入預處理后的732型陽離子樹脂進行上樣吸附，接著分別用1~3倍柱體積，pH為3~4的鹽酸、5~10倍柱體積的純化水進行洗柱，最后用濃度為0.15~0.25?mol/L的氨水進行洗脫，對洗脫液進行HPLC檢測，收集檢測有蟲草素的洗脫液，精濾，得粗提液。

（7）將粗提液pH調節至10~12后加入預處理后的717型陰離子樹脂進行上樣吸附，接著分別用1~3倍柱體積，pH為10~12的氫氧化鈉溶液進行洗柱，最后用純化水進行洗脫，對洗脫液進行HPLC檢測，收集檢測有蟲草素的洗脫液，得提純液。通過717型陰離子樹脂進一步提純蟲草素，以得到較高純度的蟲草素。

（8）對提純液進行反滲透濃縮，得第二濃縮液。對提純液再進行反滲透濃縮以提高提純液的濃度，有利于大大減少后續步驟中真空旋轉蒸發的時間，提高生產效率并降低能耗。

（9）對第二濃縮液進行真空旋轉蒸發，得蒸發濃縮液，將蒸發濃縮液置于1~5℃下結晶，抽濾后將得到的晶體溶于純化水中后至少重結晶二次，得蟲草素晶體，最后將蟲草素晶體經低溫冷凍干燥后即可。?

作為優選，所述提取原料為蛹蟲草子實體、蛹蟲草固體培養基或蛹蟲草菌絲體材料。以蛹蟲草子實體、蛹蟲草固體培養基或蛹蟲草菌絲體作為提取原料，來源廣，易得。