[發明專利]一種用于檢測凝血酶的核酸適配體生物傳感器的制備方法

有效

• 申請號: 201410189097.5
• 申請日: 2014-05-07
• 公開（公告）號: CN103926283A
• 公開（公告）日: 2014-07-16
• 發明（設計）人: 楊紹明;陳愛喜;李紅;李瑞琴;尚培玲
• 申請（專利權）人: 華東交通大學
• 主分類號: G01N27/26
• 分類號: G01N27/26;G01N33/573
• 代理公司: 南昌市平凡知識產權代理事務所 36122
• 代理人: 姚伯川

1.一種用于檢測凝血酶的核酸適配體生物傳感器的制備方法，其特征在于，所述方法步驟為：

（1）將硝酸鈷和硝酸鋁溶液混合成溶液A，將硝酸鉀、氯化鉀和碳納米管混合成懸浮液B，按A和B的體積比0.5～2.0，將溶液A和懸浮液B混合成懸浮液C；

所述溶液A的配制方法為：溶液A中硝酸鈷和硝酸鋁的摩爾比為1:1～5:1，溶液中硝酸鈷和硝酸鋁的總濃度為0.01～0.05?mol/L；

所述懸浮液B的配制方法為：溶液B中硝酸鉀、氯化鉀和碳納米管的濃度分別為0.1～0.4?mol/L、0.05～0.2?mol/L、0.5～2.0?mg/mL；

（2）將干凈的玻碳電極在混合懸浮液C中-0.7～-1.2?V電位下電沉積30～300?s，得到水滑石-碳納米管復合納米粒子修飾的玻碳電極；

（3）將（2）得到的水滑石-碳納米管修飾電極依次置于0.5～2.0μmol/L的凝血酶適配體中12～24?h，0.5～2.0?mg/mL的牛血清白蛋白中浸泡20～60?min，制得核酸適配體修飾電極；所述核酸適配體修飾電極即為測定凝血酶的核酸適配體傳感器。

2.根據權利要求1所述的一種用于檢測凝血酶的核酸適配體生物傳感器的制備方法，其特征在于，所述核酸適配體傳感器檢測凝血酶的方法如下：

利用水滑石和碳納米管的協同效應及核酸適配體對凝血酶的特異性結合作用，采用電化學阻抗法可用于對凝血酶的檢測，將核酸適配體修飾電極為工作電極，參比電極為Ag/AgCl電極，輔助電極為鉑電極，組成三電極體系，即可實現對凝血酶的檢測。

3.根據權利要求1所述的一種用于檢測凝血酶的核酸適配體生物傳感器的制備方法，其特征在于，所述核酸適配體傳感器測定凝血酶的線性范圍為1.0?pg/mL?~?500.0?ng/mL，檢測限為0.4?pg/mL。