[發(fā)明專利]小兒消積止咳口服液HPLC指紋圖譜的建立方法及其指紋圖譜

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201410188657.5
• 申請日: 2014-05-06
• 公開（公告）號: CN103954719A
• 公開（公告）日: 2014-07-30
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 趙志全;蘇瑞強;劉武占;李蔚群
• 申請（專利權(quán)）人: 魯南厚普制藥有限公司
• 主分類號: G01N30/88
• 分類號: G01N30/88
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種小兒消積止咳口服液HPLC指紋圖譜的建立方法及其HPLC標準指紋圖譜，屬于中藥制劑分析領(lǐng)域。

背景技術(shù)

小兒消積止咳口服液收載于《中國藥典》2010年版一部第一增補本，由炒山楂、檳榔、枳實、蜜枇杷葉、瓜蔞、炒萊菔子、炒葶藶子、桔梗、連翹、蟬蛻十味中藥制備而成，具有清熱肅肺、消積止咳的功能，用于小兒飲食積滯、痰熱蘊肺所致的咳嗽、夜間加重、喉間痰鳴、腹脹、口臭，具有確切的臨床療效，已收載入《國家基本藥物目錄(2012年版)》。

現(xiàn)行《中國藥典》中小兒消積止咳口服液質(zhì)量控制方法主要包括鑒別和含量測定兩方面，其中鑒別項采用薄層色譜法，分別鑒定處方中的檳榔、連翹、枳實、桔梗；含量測定項采用HPLC測定枳實中辛弗林的含量。小兒消積止咳口服液由十味中藥制備而成，僅用薄層色譜法定性鑒別藥材及用HPLC色譜法檢測其中一味中藥中指標性成分的含量不足以全面、準確地控制小兒消積止咳口服液的質(zhì)量。

中藥指紋圖譜作為一項質(zhì)量控制技術(shù)，能夠較為全面地控制藥品的質(zhì)量，具有系統(tǒng)性、整體性特點。目前，以指紋圖譜控制小兒消積止咳口服液的質(zhì)量，國內(nèi)外尚未見專利公開及文獻報道。本發(fā)明公開了一種小兒消積止咳口服液HPLC指紋圖譜的建立方法，以及用該方法制作的小兒消積止咳口服液HPLC標準指紋圖譜。在用相似度進行評價的情況下，可用其標準指紋圖譜對小兒消積止咳口服液的質(zhì)量進行全面地評價和控制，從而保證了產(chǎn)品質(zhì)量的穩(wěn)定性及臨床用藥的有效性與安全性。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是針對現(xiàn)有小兒消積止咳口服液質(zhì)量控制方法的不足，提供一種HPLC指紋圖譜的建立方法及用該方法所得的HPLC標準指紋圖譜。其特點是將小兒消積止咳口服液制備成供試品溶液，經(jīng)過HPLC分離檢測，獲得小兒消積止咳口服液HPLC標準指紋圖譜，從而為小兒消積止咳口服液的真?zhèn)舞b別和內(nèi)在質(zhì)量控制提供可靠依據(jù)。

本發(fā)明一種小兒消積止咳口服液HPLC指紋圖譜的建立方法，包括如下步驟：

1)供試品溶液的制備：取小兒消積止咳口服液，置量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，得供試品溶液；

2)HPLC色譜條件的確定：精密吸取供試品溶液，經(jīng)HPLC分離檢測，其中，流動相的組成為乙腈—0.1％磷酸溶液，采用梯度洗脫；

3)指紋圖譜的制作：按步驟2)色譜條件對小兒消積止咳口服液供試品溶液進行分析，得HPLC色譜圖，對色譜圖進行比較，得到由樣品共有特征峰構(gòu)成的小兒消積止咳口服液HPLC標準指紋圖譜。

其中，供試品溶液按具體按如下步驟制備：精密量取小兒消積止咳口服液2ml，置10ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液即得供試品溶液。

所述的HPLC色譜條件為：Kromasil?C₁₈柱，填料粒徑5μm，柱長250mm，柱內(nèi)徑4.6mm；流動相：乙腈為流動相A，0.1％磷酸溶液為流動相B，采用梯度洗脫：0-40min，流動相A的體積百分含量由2％提高至30％，流動相B的體積百分比由98％降低至70％；40-50min，流動相A的體積百分含量有由0％提高至40％，流動相B的體積百分比由70％降低至60％；檢測波長：203nm；流速：1ml/min；柱溫：30℃。

按上述譜條件對22批小兒消積止咳口服液樣品進行分析，得到22批樣品的HPLC色譜圖，對22批樣品的色譜圖進行分析比較，得到由其共有特征峰構(gòu)成的小兒消積止咳口服液HPLC標準指紋圖譜。

本發(fā)明還提供了由上述方法得到的小兒消積止咳口服液HPLC標準指紋圖譜，具體步驟是將22份小兒消積止咳口服液樣品按上述方法制備成供試品溶液，以HPLC分離檢測，使用國家藥典委員會推薦的《中藥色譜指紋圖譜相似度評價系統(tǒng)2004版》軟件分析，得到小兒消積止咳口服液HPLC標準指紋圖譜。

所述HPLC標準指紋圖譜有19個共有特征峰，其相對保留時間t_R依次分別為：0.066、0.077、0.088、0.124、0.157、0.166、0.192、0.220、0.229、0.275、0.481、0.837、0.872、0.890、0.962、1.000、1.026、1.061、1.203。