[發(fā)明專利]一種海洋生物源超氧化物歧化酶提取分離工藝

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• 申請?zhí)枺?/td>: 201410187808.5
• 申請日: 2014-05-06
• 公開（公告）號: CN103966175A
• 公開（公告）日: 2014-08-06
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 孫繼鵬;易瑞灶;洪碧紅;黃文文;陳偉珠;晉文慧
• 申請（專利權(quán)）人: 國家海洋局第三海洋研究所
• 主分類號: C12N9/02
• 分類號: C12N9/02
• 代理公司: 廈門市新華專利商標(biāo)代理有限公司 35203
• 代理人: 渠述華

1.一種海洋生物源超氧化物歧化酶提取分離工藝，其步驟包括：

步驟1、經(jīng)勻漿處理的海洋水產(chǎn)加工副產(chǎn)物魚內(nèi)臟，按比例加入緩沖溶液，調(diào)節(jié)提取液pH至6.0～7.4，控制提取溫度，攪拌提取2～6小時；

步驟2、提取液經(jīng)加熱處理去除雜蛋白，直接進入下一步工序；

步驟3、提取液冷卻后經(jīng)離心去除沉淀物，上清液通過多級超濾、微濾、納濾多元膜集成純化系統(tǒng)脫除大分子、分離提純及濃縮，獲得SOD粗品；

步驟4、SOD粗品經(jīng)葡聚糖凝膠G-100與DEAE-FF層析聯(lián)合分離純化，后經(jīng)干燥處理，獲得高純度海洋生物源SOD產(chǎn)品。

2.如權(quán)利要求1所述的海洋生物源超氧化物歧化酶提取分離工藝，其特征在于：所述步驟1中，經(jīng)勻漿海洋水產(chǎn)加工副產(chǎn)物魚內(nèi)臟與緩沖溶液的質(zhì)量體積比，即千克：升，為1:2～1:10。

3.如權(quán)利要求1或2所述的海洋生物源超氧化物歧化酶提取分離工藝，其特征在于：所述步驟1中，采用的緩沖溶液為0.05～0.3mol/L的Tris-HCL或磷酸緩沖溶液。

4.如權(quán)利要求1或2所述的海洋生物源超氧化物歧化酶提取分離工藝，其特征在于：所述步驟1中，采用的緩沖溶液采用鹽酸和氫氧化鈉控制提取過程中提取液pH至6.0～7.4。

5.如權(quán)利要求1所述的海洋生物源超氧化物歧化酶提取分離工藝，其特征在于：所述步驟1中，提取溫度控制在60℃以下。

6.如權(quán)利要求1或2所述的海洋生物源超氧化物歧化酶提取分離工藝，其特征在于：所述步驟1中，在緩沖溶液中加入銅、鋅兩種鹽，銅離子濃度控制在0.2～20.0mmol/L，鋅離子濃度控制在1～20.0mmol/L。

7.如權(quán)利要求6所述的海洋生物源超氧化物歧化酶提取分離工藝，其特征在于：所述步驟1中所用的銅鋅鹽可為硫酸鹽、鹽酸鹽或醋酸鹽。

8.如權(quán)利要求1所述的海洋生物源超氧化物歧化酶提取分離工藝，其特征在于：所述步驟2中，提取液通過加熱去除部分雜蛋白，加熱溫度為60℃，時間控制在30～120分鐘。