[發(fā)明專利]一種徳舍瑞林的合成方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201410184663.3
• 申請日: 2014-05-04
• 公開（公告）號: CN104004054A
• 公開（公告）日: 2014-08-27
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 張旭光;汪國興
• 申請（專利權(quán)）人: 安徽瀚海博興生物技術(shù)有限公司
• 主分類號: C07K7/06
• 分類號: C07K7/06;C07K1/06;C07K1/04
• 代理公司: 北京愛普納杰專利代理事務(wù)所(特殊普通合伙) 11419
• 代理人: 何自剛;王玉松

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種徳舍瑞林的合成方法，屬于化學(xué)制藥技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)

德舍瑞林又稱LHRH-Hydrogel?implant，RL0903，分子式是：C₆₄H₈₃N₁₇O₁₂，分子量是：1282.47，結(jié)構(gòu)式如圖1所示。德舍瑞林是一種人工合成的九肽，用于治療中樞性性早熟癥。

德舍瑞林是一種促黃體激素釋放激素(LHRH)激動劑，美國學(xué)者Shore等報告，對于晚期前列腺癌患者，每年一次給予德舍瑞林長效埋植劑皮下埋植，能長期穩(wěn)定地抑制睪酮，使其保持去勢水平。

現(xiàn)有的合成方法均存在著一定的缺點，每一次脫保護(hù)均需用三氟乙酸，故三廢污染多，接肽收率低，生產(chǎn)成本高，限制了德舍瑞林的大規(guī)模生產(chǎn)和應(yīng)用。

發(fā)明內(nèi)容

為解決現(xiàn)有技術(shù)中徳舍瑞林合成接肽收率低，三廢污染多的技術(shù)問題，本發(fā)明提供了一種徳舍瑞林的合成方法，采取的技術(shù)方案如下：

一種徳舍瑞林合成的方法，是以2-氯三苯甲基氯樹脂為原料，在堿性條件下與芴甲氧羰基保護(hù)脯氨酸的羧基相連，得到芴甲氧羰基保護(hù)脯氨酸-2氯三苯甲基氯樹脂，再通過接肽反應(yīng)依次接入徳舍瑞林剩余氨基酸，用全保護(hù)切割試劑裂解獲得全保護(hù)9肽片段，再通過乙胺化獲得全保護(hù)徳舍瑞林片段，最后裂解全保護(hù)徳舍瑞林片段獲得徳舍瑞林粗品。

所述方法的步驟如下：

1)制備芴甲氧羰基保護(hù)脯氨酸-2氯三苯甲基氯樹脂；

2)在步驟1)所得的芴甲氧羰基保護(hù)脯氨酸-2氯三苯甲基氯樹脂上依次接入徳舍瑞林的剩余氨基酸，獲得9肽樹脂；

3)用全保護(hù)切割試劑裂解步驟2)所得的9肽樹脂，獲得全保護(hù)9肽片段；

4)乙胺化步驟3)所得全保護(hù)9肽片段，獲得全保護(hù)徳舍瑞林片段；

5)裂解步驟4)所得全保護(hù)徳舍瑞林片段，獲得徳舍瑞林粗品。

所述方法步驟1)所述制備芴甲氧羰基保護(hù)脯氨酸-2氯三苯甲基氯樹脂，具體為用二氯甲烷浸泡2氯三苯甲基氯樹脂，充分溶脹后吹干，加入接肽試劑溶解的芴甲氧羰基保護(hù)脯氨酸，反應(yīng)后吹干，再分別用N,N-二甲基甲酰胺和甲醇洗滌吹干，獲得芴甲氧羰基保護(hù)脯氨酸2-氯三苯甲基氯樹脂；

所述接肽試劑是由N,N-二異丙基乙胺、N,N-二甲基甲酰胺按體積比＝1:15混合得到，2-氯三苯甲基氯樹脂的體積濃度為5-20ml/g，參與反應(yīng)的芴甲氧羰基保護(hù)脯氨酸摩爾數(shù)為2-氯三苯甲基氯樹脂的1.5-2倍。

方法2)所述中依次接入徳舍瑞林的剩余氨基酸，具體為按照徳舍瑞林9肽序列，從脯氨酸端依次接入除脯氨酸以外的剩余8個氨基酸：精氨酸、亮氨酸、色氨酸、酪氨酸、絲氨酸、色氨酸、組氨酸和焦谷氨酸，每次接入氨基酸均經(jīng)過脫保護(hù)反應(yīng)和接肽反應(yīng)。

所述方法中脫保護(hù)反應(yīng)的條件為：脫保護(hù)劑為哌啶、N,N-二甲基甲酰胺按體積比＝1:4混合，脫保護(hù)劑相對于被接肽樹脂的添加量為5-20ml/g樹脂，反應(yīng)溫度為20-25℃，反應(yīng)時間為5-15min；

所述接肽反應(yīng)的條件為：接肽試劑為N,N-二異丙基乙胺和N,N-二甲基甲酰胺按體積比＝1:15混合，被接物體積濃度為5-20ml/g，接入物摩爾數(shù)為被接物的2-3倍，反應(yīng)溫度為20-25℃，反應(yīng)時間為1-1.5h。

方法3)所述用全保護(hù)切割試劑裂解，具體為向步驟2)所得的9肽樹脂中加入按體積比1:99混合的三氟乙酸和二氯甲烷，反應(yīng)1-3小時，過濾，收集濾液，將濾液減壓蒸餾，獲得全保護(hù)的9肽片段。

方法4)所述的乙胺化，具體為將1-羥基苯并三唑加入到方法3)所得的全保護(hù)9肽片段中，再加入二異丙基碳二亞胺，20-25℃下反應(yīng)24小時后減壓蒸餾，獲得全保護(hù)的德舍瑞林片段。

方法5)所述的裂解全保護(hù)的德舍瑞林片段，具體為將步驟4)所得的全保護(hù)的德舍瑞林片段加入預(yù)冷至0-10℃的切肽試劑中，反應(yīng)2-3小時，加入乙醚沉淀，收集沉淀物，用乙醚淋洗3次，真空干燥，獲得德舍瑞林粗品。

所述切肽試劑是三氟乙酸、三異丙基硅烷和水按體積比95:2.5:2.5組成的混合物。

所述合成方法的具體步驟如下：

1)取150g2-氯三苯甲基氯樹脂，用1000ml二氯甲烷浸泡，使樹脂充分溶脹，再取91.1g芴甲氧羰基保護(hù)脯氨酸，用1000ml接肽試劑溶解，加入反應(yīng)器，20-25℃反應(yīng)1.5小時后吹干，分別用N,N-二甲基甲酰胺和甲醇洗滌吹干，獲得芴甲氧羰基保護(hù)脯氨酸2-氯三苯甲基氯樹脂；