[發明專利]一種表柔比星誘導建立的乳腺癌多藥耐藥性細胞株及其構建方法和應用有效
| 申請號： | 201410183516.4 | 申請日： | 2014-05-04 |
| 公開（公告）號： | CN104140953B | 公開（公告）日： | 2017-01-11 |
| 發明（設計）人： | 李敏;張麗菡;田莉;張春雨 | 申請（專利權）人： | 蘭州大學 |
| 主分類號： | C12N5/09 | 分類號： | C12N5/09;C12Q1/02;C12R1/91 |
| 代理公司： | 北京中恒高博知識產權代理有限公司11249 | 代理人： | 高松 |
| 地址： | 730000 甘肅*** | 國省代碼： | 73 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 誘導 建立 乳腺癌 耐藥性 細胞株 及其 構建 方法 應用 | ||
1.一種表柔比星誘導建立的乳腺癌多藥耐藥性細胞株，其保藏編號為：CCTCC?C201439。
2.一種乳腺癌多藥耐藥性細胞株的構建方法：
（1）將人乳腺癌MDA-MB-231細胞株常規培養于含有100U/ml青霉素，100μg/ml鏈霉素和10%胎牛血清的DMEM培養液中,置于37℃、5%?C02、95%濕度培養箱中維持培養；
（2）培養至70%-90%貼壁率時，棄上清，加入表柔比星，使其作用濃度為0.05-0.07mg/l，在37℃、5%?C02、95%濕度條件下繼續培養，24小時后換入新鮮的培養液，繼續培養，歷經6-8周，細胞穩定生長，傳代2次；
（3）適當增加表柔比星的作用濃度，在37℃、5%?C02、95%濕度條件下繼續培養，24小時后換入新鮮的培養液，繼續培養，歷經6-8周，細胞穩定生長，傳代2次；
（4）重復步驟（3），直到獲得能在含5.5-6.5mg/l表柔比星的培養體系中穩定生長、傳代及復蘇的MDA-MB-231/EPI細胞株。
3.根據權利要求2所述的構建方法，其特征在于：所述適當增加表柔比星的作用濃度是采用0.05-0.07mg/l、0.1-0.15mg/l、0.2-0.3mg/l、0.4-0.6mg/l、0.8-1.2mg/l、1.8-2.5mg/l、3.5-4.5mg/l、5.5-6.5mg/l這8個濃度梯度。
4.權利要求1所述的多藥耐藥性細胞株在耐表柔比星、紫杉醇、依托泊苷、順鉑中的應用。
5.根據權利要求4所述的應用，其特征在于：所述多藥耐藥性細胞株耐表柔比星的指數為26.27倍、耐紫杉醇的指數為12.261倍、耐依托泊苷的指數為1.739倍、耐順鉑的指數為3.834倍。
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