[發(fā)明專利]一種二倍半萜內(nèi)酯類化合物的制備方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201410180498.4
• 申請(qǐng)日: 2014-04-30
• 公開（公告）號(hào): CN103965157A
• 公開（公告）日: 2014-08-06
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 劉朝勝
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 武漢聯(lián)合藥業(yè)有限責(zé)任公司
• 主分類號(hào): C07D311/94
• 分類號(hào): C07D311/94
• 代理公司: 武漢開元知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 42104
• 代理人: 徐紹新

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種從纈草中提取分離二倍半萜內(nèi)酯類化合物的方法。

背景技術(shù)

纈草為敗醬科植物纈草(Valeriana offcinalis L.)的根及根莖。纈草藥材始載于《科學(xué)的民間藥草》，具有解痙、止痛與鎮(zhèn)靜、安神的功效；對(duì)跌打損傷、心神不安、心悸失眠、痛經(jīng)、經(jīng)閉、風(fēng)濕痹痛等癥都能起到一定的治療作用。纈草主要含環(huán)烯醚萜類、倍半萜類、生物堿類、木脂素類、黃酮類活性成分，是優(yōu)良的天然藥物資源。它廣泛收載于各國(guó)藥典，我國(guó)早期藥典及地方藥品標(biāo)準(zhǔn)也曾收載。

我們對(duì)纈草化學(xué)成分進(jìn)行了深入研究，從纈草中提取分離出一種新的二倍半萜內(nèi)酯類化合物，該化合物系首次從纈草中分離得到。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種二倍半萜內(nèi)酯類化合物的制備方法，該化合物是首次從纈草中提取分離得到，化合物的結(jié)構(gòu)如式Ⅰ所示：

該方法包括以下步驟：

1)提?。喝》鬯楹玫睦i草藥材，用有機(jī)溶劑提?。?/p>

2)萃?。簩⑻崛∫簼饪s后用非極性有機(jī)溶劑萃取，收集萃取液；

3)分離：將萃取液進(jìn)行柱色譜分離，并用與該柱色譜相適應(yīng)的洗脫劑進(jìn)行梯度洗脫，用薄層色譜法檢查得到的洗脫流份，然后合并含有結(jié)構(gòu)如式Ⅰ所示的二倍半萜內(nèi)酯類化合物的洗脫流份，減壓濃縮后得到粗品，將粗品用非極性有機(jī)溶劑溶解后按前述方法再進(jìn)行1-3次柱色譜分離，洗脫，將洗脫流份濃縮，干燥得到純品。

采用本領(lǐng)域技術(shù)人員都能掌握的常規(guī)方法對(duì)纈草藥材進(jìn)行提取，如浸漬、熱回流、超聲、滲漏等方法。提取所采用的有機(jī)溶劑包括乙酸乙酯、乙酸丁酯、乙醚、氯仿、石油醚、乙醇等，本發(fā)明優(yōu)選的有機(jī)溶劑是50-90％(重量百分比)乙醇水溶液，該溶劑不僅成本低、安全性高，而且提取的目標(biāo)成分轉(zhuǎn)移率(提取物中目標(biāo)成分總量占藥材中目標(biāo)成分總量的比率)最高，而轉(zhuǎn)移率越高，說明提取越充分。

優(yōu)選的柱色譜填料為硅膠，進(jìn)一步優(yōu)選采用粒徑為200-300目的硅膠。

優(yōu)選的，步驟3)中所述的洗脫劑是由石油醚(60-90℃)與乙酸乙酯組成的復(fù)合溶劑，所述復(fù)合溶劑中乙酸乙酯的體積百分比為1-5％，最佳為1-2％。薄層試驗(yàn)表明：采用該洗脫劑雜質(zhì)和目標(biāo)成分的分離效果最好(見附圖8-12)。

進(jìn)一步優(yōu)選的，步驟3)中，將萃取液進(jìn)行柱色譜分離，先用體積比為99∶1的石油醚(60-90℃)與乙酸乙酯復(fù)合溶劑洗脫，用薄層色譜法檢查得到的洗脫流份，當(dāng)洗脫流份中出現(xiàn)結(jié)構(gòu)如式Ⅰ所示的化合物時(shí)，再用體積比為98∶2的石油醚(60-90℃)與乙酸乙酯復(fù)合溶劑洗脫，合并含有結(jié)構(gòu)如式Ⅰ所示的二倍半萜內(nèi)酯類化合物的洗脫流份，減壓濃縮后得到粗品，將粗品用非極性有機(jī)溶劑溶解后按前述方法再進(jìn)行1-3次柱色譜分離，洗脫，將洗脫流份濃縮，干燥得到純品。

優(yōu)選的，還包括在進(jìn)行萃取前，先將提取液通過大孔吸附樹脂柱進(jìn)行洗脫、純化的步驟。增加該步驟后，不僅能進(jìn)一步提高產(chǎn)品的純度，還有利于縮短全部工藝的時(shí)間周期。

優(yōu)選的，所述非極性有機(jī)溶劑是石油醚或正己烷或環(huán)己烷。

本發(fā)明的有益效果是：

1)采用該方法能夠首次從纈草中獲得一種新的二倍半萜內(nèi)酯類化合物。

2)采用該方法獲得的二倍半萜內(nèi)酯類化合物純度和收率高，其中純度可達(dá)98％以上，轉(zhuǎn)移率可達(dá)60％左右。

3)該方法工藝簡(jiǎn)單，周期短，生產(chǎn)成本低，容易實(shí)現(xiàn)工業(yè)化大生產(chǎn)。

附圖說明

圖1是實(shí)施例1中本發(fā)明化合物的高效液相色譜圖。

圖2是本發(fā)明化合物的6、24位H-HMBC碎片相關(guān)譜。

圖3是本發(fā)明化合物的2、23位H-HMBC碎片相關(guān)譜。

圖4是本發(fā)明化合物的20位CH₃-HMBC碎片相關(guān)譜。

圖5是本發(fā)明化合物的11位CH₃-HMBC碎片相關(guān)譜。

圖6是本發(fā)明化合物的16位CH₃-HMBC碎片相關(guān)譜。

圖7是本發(fā)明化合物的2、4、7位H-HMBC碎片相關(guān)譜。

圖8是以石油醚(60-90℃)與乙酸乙酯(98∶2)為展開劑的薄層色譜照片。

圖9是以石油醚(60-90℃)與乙酸丁酯(98∶2)為展開劑的薄層色譜照片。

圖10是以正己烷與乙酸乙酯(98∶2)為展開劑的薄層色譜照片。

圖11是以石油醚(60-90℃)與乙酸乙酯(99∶1)為展開劑的薄層色譜照片。