[發(fā)明專利]抗氯霉素和克倫特羅的雙特異性單克隆抗體及其制備方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201410173658.2
• 申請(qǐng)日: 2014-04-28
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN103951755A
• 公開(kāi)（公告）日: 2014-07-30
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 金仁耀;桑永玉
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 浙江工商大學(xué)
• 主分類號(hào): C07K16/46
• 分類號(hào): C07K16/46
• 代理公司: 杭州浙科專利事務(wù)所(普通合伙) 33213
• 代理人: 吳秉中

1.??一種抗氯霉素和克倫特羅的雙特異性單克隆抗體，其特征在于所述的雙特異性單克隆抗體對(duì)氯霉素和克倫特羅同時(shí)具有特異性。

2.一種抗氯霉素和克倫特羅的雙特異性單克隆抗體的制備方法，其特征在于包括以下步驟：

1）合成氯霉素和克倫特羅的半抗原和人工抗原；

2）利用氯霉素人工抗原制備分泌抗氯霉素單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞株；

3）利用克倫特羅人工抗原制備分泌抗克倫特羅單克隆抗體的雜交瘤細(xì)胞株；

4）分泌抗氯霉素抗體的雜交瘤細(xì)胞株和分泌抗克倫特羅抗體的雜交瘤細(xì)胞株進(jìn)行細(xì)胞融合后篩選得到四體雜交瘤細(xì)胞，所述的四體雜交瘤細(xì)胞分泌抗氯霉素和克倫特羅的雙特異性單克隆抗體。

3.如權(quán)利要求2所述的抗氯霉素和克倫特羅的雙特異性單克隆抗體的制備方法，其特征在于所述的步驟2）中分泌抗氯霉素的雜交瘤細(xì)胞株通過(guò)以下方法制備得到：以琥珀酸氯霉素為半抗原，合成人工抗原后免疫小鼠，再取脾細(xì)胞與SP2/0細(xì)胞進(jìn)行融合、篩選，獲得分泌抗氯霉素抗體的雜交瘤細(xì)胞，然后經(jīng)過(guò)含8-雜氮鳥嘌呤或5-溴-2-脫氧尿苷篩選，獲得HGPRT酶或者TK酶缺陷的雜交瘤細(xì)胞株。

4.如權(quán)利要求2所述的抗氯霉素和克倫特羅的雙特異性單克隆抗體的制備方法，其特征在于所述的步驟3）中分泌抗克倫特羅的雜交瘤細(xì)胞株通過(guò)以下方法制備得到：克倫特羅活化后為半抗原，重氮化法合成人工抗原后免疫小鼠，再取脾細(xì)胞與SP2/0細(xì)胞進(jìn)行融合、篩選，獲得分泌抗克倫特羅的雜交瘤細(xì)胞，然后經(jīng)過(guò)含5-溴-2-脫氧尿苷或8-雜氮鳥嘌呤篩選，獲得TK酶或者HGPRT酶缺陷的分泌抗克倫特羅的雜交瘤細(xì)胞株。