[發明專利]抗喹乙醇和安普霉素的雙特異性單克隆抗體及其制備方法

在審

• 申請號: 201410173591.2
• 申請日: 2014-04-28
• 公開（公告）號: CN103951750A
• 公開（公告）日: 2014-07-30
• 發明（設計）人: 金仁耀;桑永玉
• 申請（專利權）人: 浙江工商大學
• 主分類號: C07K16/12
• 分類號: C07K16/12;C07K16/44;C12N5/20
• 代理公司: 杭州浙科專利事務所(普通合伙) 33213
• 代理人: 吳秉中

1.一種抗喹乙醇和安普霉素的雙特異性單克隆抗體，其特征在于所述的雙特異性單克隆抗體對喹乙醇和安普霉素同時具有特異性。

2.一種抗喹乙醇和安普霉素的雙特異性單克隆抗體的制備方法，其特征在于包括以下步驟：

1）合成喹乙醇和安普霉素的半抗原和人工抗原；

2）利用喹乙醇人工抗原制備分泌抗喹乙醇單克隆抗體的雜交瘤細胞株；

3）利用安普霉素人工抗原制備分泌抗安普霉素單克隆抗體的雜交瘤細胞株；

4）分泌抗喹乙醇抗體的雜交瘤細胞株和分泌抗安普霉素抗體的雜交瘤細胞株進行細胞融合后篩選得到四體雜交瘤細胞，所述的四體雜交瘤細胞分泌抗喹乙醇和安普霉素的雙特異性單克隆抗體。

3.如權利要求2所述的抗喹乙醇和安普霉素的雙特異性單克隆抗體的制備方法，其特征在于所述的步驟2）中分泌抗喹乙醇單克隆抗體的雜交瘤細胞株通過以下方法制備得到：以琥珀酸喹乙醇為半抗原，合成人工抗原后免疫小鼠，再取脾細胞與SP2/0細胞進行融合、篩選，獲得分泌抗喹乙醇抗體的雜交瘤細胞，然后經過含8-雜氮鳥嘌呤或5-溴-2-脫氧尿苷篩選，獲得HGPRT酶或者TK酶缺陷的雜交瘤細胞株。

4.如權利要求2所述的抗喹乙醇和安普霉素的雙特異性單克隆抗體的制備方法，其特征在于所述的步驟3）中分泌抗安普霉素單克隆抗體的雜交瘤細胞株通過以下方法制備得到：安普霉素活化后為半抗原，EDC法和戊二醛法合成人工抗原后免疫小鼠，再取脾細胞與SP2/0細胞進行融合、篩選，獲得分泌抗安普霉素的雜交瘤細胞，然后經過含5-溴-2-脫氧尿苷或8-雜氮鳥嘌呤篩選，獲得TK酶或者HGPRT酶缺陷的分泌抗安普霉素的雜交瘤細胞株。