[發明專利]光皮樺植物組織培養方法及其培養基

有效

• 申請號: 201410173069.4
• 申請日: 2014-04-28
• 公開（公告）號: CN105010133B
• 公開（公告）日: 2018-01-09
• 發明（設計）人: 劉志喬
• 申請（專利權）人: 湖南永興強林林業科技發展有限公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 北京英賽嘉華知識產權代理有限責任公司11204
• 代理人: 王達佐,洪欣

技術領域

本申請涉及植物無性繁殖技術領域。

背景技術

光皮樺(Betula luminifera)，又名亮葉樺，其是廣泛分布于我國亞熱帶地區的一種珍貴用材樹種。光皮樺木材質地良好，供制各種器具，可用于家具、航空、軍工等多種用途。目前林業生產部門主要采用種子培育實生苗造林，實生苗因為基因的多樣性，造林后生長表型不一，很難達到群體高產的目的。

植物活細胞具有能夠發育成為完整植株的潛在能力，稱之為細胞的全能性。植物組織培養是根據植物細胞的全能性原理發展起來的一項植物無性繁殖技術，在無菌和人工控制條件下，對植物的原生質體、細胞、組織和器官進行離體培養，并控制其生長發育，其是當今世界新技術革命的重要組成部分，為植物學科的研究及植物生產提供了有效而簡便的方法。植物組織培養能為林業生產中苗木的培育提供有效的無性繁殖方法。

無性系是某一原始母株通過無性繁殖產生的無數分株的總稱，無性系苗木因為基因相同，造林后表型均一。采用光皮樺組織培養方法能夠繁殖大量的優良無性系苗木，造林后可達到群體高產的目的。

MS培養基是Murashige和Skoog于1962年為煙草細胞培養設計的，其特點是無機鹽和離子濃度較高，是較穩定的離子平衡溶液，它的硝酸鹽含量高，其養分的數量和比例合適，能滿足植物細胞的營養和生理需要，因而適用范圍比較廣，多數植物組織培養快速繁殖用它作為培養基的基本培養基。由于配方中的離子濃度高，在配制、貯存和消毒等過程中，即使有些成分略有出入，也不會影響離子間的平衡。

諶紅輝等人(2006)開發了光皮樺葉芽離體培養再生植株技術，其增殖培養增殖系數為3.2，生根培養的生根率為86％。

孫曉敏(2012)建立了光皮樺組織快繁技術，其使用6-BA和TDZ直接誘導叢生不定芽分化，并單獨使用IBA對不定芽誘導生根。

發明內容

本申請涉及光皮樺植物組織培養方法，其包括以下步驟：將外植體在誘導培養基中誘導培養，得到誘導芽；將誘導芽在增殖培養基中增殖培養，得到增殖芽；和將所述增殖芽在包含6-BA、IBA和NAA的生根培養基中生根培養，得到生根苗。

本申請還涉及光皮樺植物組織培養基，其包括誘導培養基、生根培養基和任選地增殖培養基，其特征在于所述生根培養基包含6-BA、IBA和NAA。

本申請另外涉及由本申請所述的培養方法產生的誘導芽、增殖芽或生根苗。任選地，還涉及由本申請所述的培養方法產生的植物。

附圖說明

圖1為根據本申請方法中誘導培養步驟得到的外植體誘導芽。

圖2例示了本申請增殖培養步驟的效果。

圖3為根據本申請方法中生根培養步驟得到的生根苗。

具體實施方案

本申請提供了改進的用于光皮樺組織培養方法及用于該方法的培養基，以及通過該方法產生的植物，其與已知的培養基及方法相比提供了顯著的優勢。本申請利用植物組織培養方法，采集光皮樺樹葉芽進行無性繁殖，培育出優良無性系苗木用于生產造林，以提高林地木材產量。本申請能通過技術組裝配套，對優良無性系苗進行工廠化快速繁育，既能保證按計劃生產苗木，擺脫樹木產種量大小年對苗木的限制，降低苗木生產成本，又能提高林地木材產量，相對于傳統的實生苗培育有著明顯的整體優勢。

在第一方面，本申請提供了光皮樺植物組織培養方法，其包括以下步驟：將外植體在誘導培養基中誘導培養，得到誘導芽；將誘導芽在增殖培養基中增殖培養，得到增殖芽；和將所述增殖芽在包含6-BA、IBA和NAA的生根培養基中生根培養，得到生根苗。

6-BA，6-芐氨基腺嘌呤，屬于一種安全高效的植物生長調節劑，主要用于促進細胞分裂，促進非分化組織分化，促進側芽發生，防止老化等作用。

IBA，吲哚丁酸，可誘導根原體的形成，促進細胞分化和分裂，有利于新根生成和維管束系統的分化，促進插條不定根的形成。

NAA，萘乙酸，能促進細胞分裂與擴大，誘導形成不定根。

在一實施方案中，所述生根培養基包含約0.15-0.25mg/L的6-BA、約0.8-1.2mg/L的IBA和約0.8-1.2mg/L的NAA。在一實施方案中，所述生根培養基包含約0.2mg/L的6-BA、約1.0mg/L的IBA和約1.0mg/L的NAA。