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[發明專利]一種海洋微藻來源的血管緊張素轉化酶抑制肽有效

專利信息
申請號: 201410172674.X 申請日: 2014-04-26
公開(公告)號: CN103923177A 公開(公告)日: 2014-07-16
發明(設計)人: 徐年軍;吳昊;孫雪;余虹 申請(專利權)人: 寧波大學
主分類號: C07K7/06 分類號: C07K7/06;C12P21/02;A61K38/08;A61P9/12;C07K1/16
代理公司: 北京科億知識產權代理事務所(普通合伙) 11350 代理人: 湯東鳳
地址: 315211 浙*** 國省代碼: 浙江;33
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摘要:
搜索關鍵詞: 一種 海洋 來源 血管 緊張 轉化 抑制
【權利要求書】:

1.一種多肽,其特征在于,所述的多肽的其氨基酸序列為SEQ?ID?NO:1。

2.權利要求1所述的多肽作為血管緊張素轉化酶抑制肽的應用。

3.權利要求1所述的多肽在制備治療或預防高血壓的制品中的應用。

4.一種治療或預防高血壓的制品,其特征在于,所述的制品為包含有藥理有效濃度的權利要求1所述的多肽的食品或藥品。

5.權利要求1所述的多肽是從球等鞭金藻中分離的。

6.權利要求1所述的多肽的制備方法,其步驟如下:

1)球等鞭金藻蛋白的制備:

將球等鞭金藻按照1:15加入到1.5%氯化鈉溶液中,調整為pH為6.0-8.0,超聲波提取,破碎后4℃、5000r/min離心15min,分離上清液;沉淀的藻泥加入氯化鈉溶液超聲波再提取2次,合并上清液,冷凍干燥即為粗蛋白;

2)酶解:

將步驟1)中粗蛋白,按照酶和粗蛋白比為6:100加入酶,溶液pH調整為8.0,在溫度為50℃的條件下進行酶解,酶解時間為3-6h;酶解完成后在90℃下滅活酶10min,然后取上清液;

3)分離:

取步驟2)中酶解得到得上清液,用0.45μm微孔濾膜過濾,將樣品上樣于平衡好的Sephadex?G-25凝膠色譜柱,用醋酸-醋酸鈉緩沖液洗柱至220nm處吸收峰回到基線,用醋酸-醋酸鈉緩沖液對樣品進行洗脫,洗脫的流速是0.5mL/min;收集各個成分進行冷凍干燥并檢測活性,在-20℃條件下保存;

4)純化:

取步驟3)冷凍干燥的粉末,進過AKTA?purifier純化,流動相A相:純水;B相:甲醇,從0-100%梯度洗脫,流速為1.0ml/min,檢測波長為220nm,收集各個組分,收集保留時間約為24min的色譜峰,冷凍干燥完成制備。

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