[發明專利]對L-抗壞血酸進行微生物生產的方法

無效

• 申請號: 201410171433.3
• 申請日: 2004-08-16
• 公開（公告）號: CN104004776A
• 公開（公告）日: 2014-08-27
• 發明（設計）人: 阿蘭·貝利;康妮·李;安妮·弗朗索瓦·邁耶;新城雅子
• 申請（專利權）人: 帝斯曼知識產權資產管理有限公司
• 主分類號: C12N15/53
• 分類號: C12N15/53;C12N9/04;C12N15/70;C12N1/21;C12P17/04;C12R1/19;C12R1/02;C12R1/01
• 代理公司: 北京東方億思知識產權代理有限責任公司 11258
• 代理人: 肖善強

1.一種經過分離的多核苷酸分子，所述多核苷酸分子是可從編碼具有L-山梨糖酮脫氫酶活性的多肽的多核苷酸獲得的，所述多核苷酸分子包含SEQ?ID?NO：1的至少20個連續核苷酸的部分核苷酸序列。

2.如權利要求1所述的經過分離的多核苷酸分子，其中，SEQ?ID?NO：1的部分核苷酸序列具有至少50個連續核苷酸。

3.如權利要求1所述的經過分離的多核苷酸分子，其中，SEQ?ID?NO：1的部分核苷酸序列具有至少100個連續核苷酸。

4.如權利要求3所述的經過分離的多核苷酸分子，其中，所述部分核苷酸序列可從下述多核苷酸序列獲得，當對至少100個連續核苷酸進行比較時，所述多核苷酸序列與SEQ?ID?NO：1具有至少60％的同源性。

5.如權利要求1至4中任意一項所述的經過分離的多核苷酸分子，所述部分核苷酸序列可從與SEQ?ID?NO：1具有至少80％的同源性的多核苷酸序列獲得。

6.如權利要求1至5中任意一項所述的經過分離的多核苷酸分子，所述部分核苷酸序列可從與SEQ?ID?NO：1具有至少90％的同源性的多核苷酸序列獲得。

7.如權利要求1至6中任意一項所述的經過分離的多核苷酸分子，其選自由SEQ?NOs：1、11、13、15、17、19、21和26所構成的組。

8.如權利要求1所述的經過分離的多核苷酸分子，其中所述部分核苷酸序列選自由SEQ?ID?NOs：5、6、7、8、9、10、23和24所構成的組。

9.一種多肽，所述多肽由前述權利要求中任意一項所述的多核苷酸編碼。

10.如權利要求9所述的多肽，其包含選自由SEQ?ID?NO：2、12、14、16、18、20、22和27所構成的組的至少25個連續氨基酸的部分氨基酸序列。

11.如權利要求9或10所述的多肽，其中，所述部分氨基酸序列具有至少35個連續氨基酸。

12.一種重組DNA分子，所述分子用于表達具有L-山梨糖酮脫氫酶活性的多肽，所述重組DNA分子包含如權利要求1至7中任意一項所述的多核苷酸。

13.一種表達載體，其中包含如權利要求12所述的重組DNA分子。

14.一種重組生物，其已被如權利要求12所述的重組DNA和/或權利要求13的表達載體所轉化。

15.如權利要求14所述的重組生物，其中，所述重組DNA至少部分整合進了染色體。

16.如權利要求14或15所述的重組生物，其選自由真菌、植物、動物和細菌細胞所構成的組。

17.如權利要求16所述的重組生物，其中所述生物是選自由Gluconobacter、Acetobacter、Pseudomonas和Escherichia所構成的組的屬的細菌。

18.一種用于從選自D-山梨糖醇、L-山梨糖和L-山梨糖酮的底物來生產L-抗壞血酸的方法，所述方法包括：

(a)在合適的培養基中繁殖如權利要求14至17中任意一項所述的重組生物，以及

(b)從所述培養基中回收和分離L-抗壞血酸。

19.一種用于從選自D-山梨糖醇、L-山梨糖和L-山梨糖酮的底物來生產L-抗壞血酸的方法，所述方法包括：

(a)在合適的培養基中繁殖編碼如權利要求9中所述的多肽的非重組生物，以及

(b)從所述培養基中回收和分離L-抗壞血酸。

20.一種用于生產L-抗壞血酸的方法，所述方法包括：將選自D-山梨糖醇、L-山梨糖和L-山梨糖酮的底物與權利要求9的經過分離的多肽接觸。