[發(fā)明專利]一種嗜熱鏈球菌凍干菌粉制備方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201410171384.3
• 申請日: 2014-04-25
• 公開（公告）號: CN103937725A
• 公開（公告）日: 2014-07-23
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 陳合;陳世偉;舒國偉
• 申請（專利權(quán)）人: 陜西科技大學(xué)
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12R1/46
• 代理公司: 西安通大專利代理有限責(zé)任公司 61200
• 代理人: 蔡和平

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于嗜熱鏈球菌制品生產(chǎn)技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種嗜熱鏈球菌凍干菌粉制備方法。

背景技術(shù)

嗜熱鏈球菌(Streptococcus?thermophilus)是發(fā)酵生產(chǎn)乳制品的重要乳酸菌之一，其在發(fā)酵過程中，除進(jìn)行產(chǎn)酸代謝外，還產(chǎn)生2,3-丁二酮等酸奶特有的風(fēng)味物質(zhì)，還能促進(jìn)保加利亞乳桿菌的生長，同時(shí)也是重要的益生菌之一，其具有調(diào)節(jié)人體胃腸道菌群平衡、抗突變、增強(qiáng)免疫力等能力。

在發(fā)酵劑制備過程中，常用的是真空冷凍干燥法，菌種在真空冷凍干燥后：酶的活性喪失少、凍干燥菌粉復(fù)水性好、脫水徹底、保存期長、儲存運(yùn)輸和使用都很方便，為直投式發(fā)酵劑提供良好的基礎(chǔ)。但是，在實(shí)際的使用時(shí)，冷凍干燥過程中水的結(jié)晶、細(xì)胞的失水、蛋白失活等情況使得菌體出現(xiàn)死亡或損傷，對于菌種的保存、生產(chǎn)使用非常不利。因此需要對菌粉制備方法進(jìn)行改進(jìn)。

對于嗜熱鏈球菌凍干菌粉制備的改進(jìn)方法有很多種，如進(jìn)行增殖培養(yǎng)、抗凍因子添加、保護(hù)劑配方的制備等。如專利CN102952771B公開了一種嗜熱鏈球菌凍干保護(hù)劑和制備方法，其凍干保護(hù)劑配方如下：脫脂乳粉10-20份、棉籽糖3-10份、大豆低聚糖4-10份、右旋糖酐D401.5-5.0份、三磷酸鈉0.3-0.8份、沒食子酸丙酯0.005-0.02份、蒸餾水100份。專利CN100429980C公開了一種直投式酸奶發(fā)酵劑的生產(chǎn)方法，其培養(yǎng)基配方為(質(zhì)量百分比)：脫脂乳粉0.1-15％、乳清粉0.1-10％、酵母膏0.1-5％、番茄汁1-10％，其余為水；其保護(hù)劑配方為(質(zhì)量百分比)：谷氨酸鈉0.1-5.0％、乳糖0.1-8.0％、甘油0.1-5.0％、聚乙烯吡咯烷酮0.1-3.0％、Vc0.1-5％。專利CN101502287B也公開了一種直投式酸奶發(fā)酵劑的制備方法，其所使用的培養(yǎng)基為(質(zhì)量百分比)：1-2％葡萄糖、0.5-1％蛋白胨、0.1-10％乳清粉、1-5％酵母膏、0.1-0.5％檸檬酸二銨、0.01-0.2％磷酸氫二鉀、0.1-0.5％無水乙酸鈉；其所使用的保護(hù)劑為：重量百分比1-30％的奶粉及0.1-2％的抗氧化劑(異維生素C或谷氨酸或甘氨酸)。CN103404703A公開了一種穩(wěn)定安全的嗜熱鏈球菌活菌制劑及其制備方法，其培養(yǎng)基配方為：酵母膏7.5g、蛋白胨7.5g、葡萄糖10g、KH₂PO₄2g、西紅柿汁100mL、Tween800.5mL、蒸餾水900mL。專利CN102766590B公開了一種嗜熱鏈球菌增菌培養(yǎng)基及制備方法，其配方如下：葡萄糖0.8-1.2g、酵母膏0.5-1.0g、大豆蛋白胨0.5-1.0g、番茄汁8-12mL、低聚木糖0.2-0.4g、水88-92mL、KH₂PO₄0.1-0.2g和吐溫800.01-0.05mL。CN102978150A公開了一種嗜熱鏈球菌復(fù)合抗凍因子，其配方如下(以質(zhì)量份數(shù)計(jì))：甜菜堿0.1-0.4份、氯化鈉3-5份、甘露糖0.5-3份和碳酸鈣0.1-0.4份。另外有許多研究文獻(xiàn)也公開了嗜熱鏈球菌的菌粉制備方法，如“嗜熱鏈球菌的篩選及其高活性菌粉制備”中研究得到的增殖培養(yǎng)基配方為：酵母粉0.5％、番茄汁7.5％、麥芽汁7.5％、乳清粉7.5％；保護(hù)劑配方為：海藻糖20％、乳糖2.5％、谷氨酸鈉5％、甘油0.5％。

凍干保護(hù)劑的使用極大地提高了菌體在真空冷凍干燥下的存活率和凍干菌粉的穩(wěn)定性，而在培養(yǎng)基中添加一些可以促進(jìn)細(xì)胞產(chǎn)生抗凍效果的分子物質(zhì)也有利于其凍干菌粉的制備。這些物質(zhì)的添加也可改變嗜熱鏈球菌細(xì)胞膜脂肪酸組成，甚至誘導(dǎo)細(xì)胞產(chǎn)生大量的抗凍蛋白，從而有效提高嗜熱鏈球菌菌體的抗冷凍能力，可以達(dá)到減少甚至避免菌體凍干損傷、提高活菌存活率和菌粉活菌數(shù)、減少復(fù)合凍干保護(hù)劑的添加量、延長凍干嗜熱鏈球菌菌粉常溫保存期的目的。

白扁豆、薏苡仁和山藥作為衛(wèi)生部頒布的“藥食同源”藥物，其所含的多糖對人體具有抗氧化、抗腫瘤、降血脂、增強(qiáng)免疫力等作用，此外，這些多糖還可以有效刺激乳酸菌的菌體增殖，也可以作為抗凍因子，并且在凍干保護(hù)方面也具有良好效果。目前，使用這一類型多糖在凍干菌粉制備方面的報(bào)道和發(fā)明專利極少。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的是提供一種更好地開發(fā)利用我國中藥資源作為凍干保護(hù)劑、提高菌體抗凍能力的嗜熱鏈球菌凍干菌粉制備方法。

本發(fā)明的技術(shù)方案包括以下步驟：

a)菌種活化與增殖培養(yǎng)：將嗜熱鏈球菌菌種接種到M17液體培養(yǎng)基中活化，將已活化的菌種接種于增殖抗凍培養(yǎng)基中增殖培養(yǎng)，得到增殖的菌液；