[發明專利]一種辣椒素人工半抗原、人工抗原及其制備方法

有效

• 申請號: 201410171292.5
• 申請日: 2014-04-25
• 公開（公告）號: CN103951577A
• 公開（公告）日: 2014-07-30
• 發明（設計）人: 李培武;馬飛;張奇;楊青青;張良曉;丁小霞;張文
• 申請（專利權）人: 中國農業科學院油料作物研究所
• 主分類號: C07C233/18
• 分類號: C07C233/18;C07C231/12;C07K14/765;C07K14/77;C07K14/795;C07K1/107;C07K16/44;G01N33/566
• 代理公司: 湖北武漢永嘉專利代理有限公司 42102
• 代理人: 喬宇

1.辣椒素人工半抗原化合物，其特征在于：它具有式Ⅰ所示的分子結構：?

2.辣椒素人工抗原化合物，其特征在于：它的分子結構式如式Ⅱ所示：?

。

3.根據權利要求2所述的辣椒素人工抗原化合物，其特征在于：所述載體蛋白為牛血清白蛋白BSA、卵清白蛋白OVA或鑰孔血藍蛋白KLH。?

4.權利要求1所述的辣椒素人工半抗原化合物的合成方法，其特征在于：以N-(4-羥基-3-甲氧基芐基)壬酰胺與4-溴代丁酸乙酯為原料經溴代成醚反應，得到式Ⅲ化合物，然后將其中的酯基團水解制得辣椒素人工半抗原化合物Ⅰ，合成路線如下：?

5.根據權利要求4所述的辣椒素人工半抗原化合物的合成方法，其特征在于：包括以下步驟：?

(1)將摩爾比為1:(1.2～1.5)的N-(4-羥基-3-甲氧基芐基)壬酰胺和4-溴丁酸乙酯分?別溶解于N,N-二甲基甲酰胺中，得到相應的N-(4-羥基-3-甲氧基芐基)壬酰胺溶液和4-溴丁酸乙酯溶液，然后將4-溴丁酸乙酯溶液置于恒壓漏斗，緩慢滴加至N-(4-羥基-3-甲氧基芐基)壬酰胺溶液中，待滴加完畢，在105～110℃條件下反應5-7h，后處理得到中間產物Ⅲ；?

(2)將中間產物Ⅲ在堿性條件下水解，后處理得到辣椒素人工抗原。?

6.權利要求2所述的辣椒素人工抗原化合物的合成方法，其特征在于：它是將權利要求1所述的辣椒素人工半抗原通過N,N’-二環己基碳二亞胺DCC與N-羥基琥珀酰亞胺NHS活化后，再與載體蛋白進行偶聯得到。?

7.權利要求6所述的辣椒素人工抗原化合物的制備方法，其特征在于：包括以下具體步驟：?

(1)將辣椒素人工半抗原在N,N-二甲基甲酰胺中與N-羥基琥珀酰亞胺(NHS)室溫反應1-2小時，然后加入二環己基碳二亞胺的N,N-二甲基甲酰胺溶液，室溫反應4-6小時，靜置過夜，取上清液即活化的辣椒素人工半抗原溶液，所述N-羥基琥珀酰亞胺(NHS)和二環己基碳二亞胺的摩爾比為1:1-1.1；?

(2)將上清液滴加到載體蛋白濃度大于等于2mg/mL的載體蛋白的磷酸鹽緩沖液中，室溫條件反應12-14h，其中：所述步驟(1)中的辣椒素人工半抗原與載體蛋白的摩爾比大于5:1，然后透析得到辣椒素人工抗原。?

8.權利要求2所述的辣椒素人工抗原化合物在制備辣椒素特異性抗體中的應用。?

9.權利要求2所述的辣椒素人工抗原化合物在食用植物油中辣椒素免疫檢測中的應用。?

10.辣椒素特異性抗體，其特征在于：它是由權利要求1所述的辣椒素人工抗原經動物免疫得到的可與辣椒素發生特異性免疫反應的球蛋白。?