[發明專利]沙門氏菌檢測方法及檢測用培養基

有效

• 申請號: 201410167738.7
• 申請日: 2014-04-24
• 公開（公告）號: CN103898191A
• 公開（公告）日: 2014-07-02
• 發明（設計）人: 劉輝;陳玉貞;胡光春;劉嵐錚;張濟;李健;時玉雯
• 申請（專利權）人: 濟南市疾病預防控制中心
• 主分類號: C12Q1/04
• 分類號: C12Q1/04
• 代理公司: 濟南圣達知識產權代理有限公司 37221
• 代理人: 彭成

1.一種沙門氏菌檢測方法，其特征在于：步驟如下：

(一)填裝毛細管：以內徑為0.5～5mm、長度3～10cm的直管毛細管為容器，裝載MSTT培養基或MSRV培養基；

所述MSTT培養基的組成為：每1L培養基中，含有以下組分：5.0～10.0g蛋白胨，0～5.0g牛肉膏，0～3.0g氯化鈉，1.0～5.0g膽鹽，30.0～50.0g硫代硫酸鈉，9～10mg煌綠，4.0～5.0g碘，5.0～6.0g碘化鉀，2.5～3.0g瓊脂，0或20～40mg新生霉素，余量為水；

(二)檢測：進行以下兩種操作之一，或以下兩種操作都進行：

(1)將上述填裝培養基后的毛細管的一端接入液態待檢樣本、待檢樣本的稀釋液、含有待檢樣本的預增菌液或含有待檢樣本的增菌液中，另一端密封或接入培養基中，該培養基與毛細管內填裝的培養基相同；若毛細管中接入的培養基為MSTT培養基，則培養16<t≤48h后，進行觀察；若毛細管中接入的培養基為MSRV培養基，則培養30<t≤72h后，進行觀察；

(2)將液態待檢樣本、待檢樣本的稀釋液、含有待檢樣本的預增菌液或含有待檢樣本的增菌液接種到四硫磺酸鈉煌綠肉湯、Muller-Kauffmann四硫磺酸鈉新生霉素肉湯、Rappaport-Vassiladis胰蛋白胨肉湯、Rappaport-Vassiladis肉湯或亞硒酸鹽胱氨酸增菌液中，得接種液；然后將上述填裝培養基后的毛細管的一端接入接種液中，另一端密封或接入培養基中，該培養基與毛細管內填裝的培養基相同；若毛細管中接入的培養基為MSTT培養基，則培養16<t≤48h后，進行觀察；若毛細管中接入的培養基為MSRV培養基，則培養30<t≤72h后，進行觀察；

所述觀察是指：觀察毛細管內、毛細管密封端、毛細管接入培養基的一端或毛細管所接入的培養基，觀察是否有暈環，有暈環者為疑似陽性結果，表明待檢樣本中可能含有沙門氏菌；無暈環者為陰性結果，表明待檢樣本中不含有沙門氏菌。

2.根據權利要求1所述的沙門氏菌檢測方法，其特征在于：還包括以下步驟：

(三)鑒定：對上述檢測結果為疑似陽性結果的待檢樣本進行鑒定，以進一步確定待檢樣本中是否含有沙門氏菌。

3.根據權利要求1所述的沙門氏菌檢測方法，其特征在于：所述毛細管選擇選內徑1mm、長度5cm的直管毛細管。

4.根據權利要求1所述的沙門氏菌檢測方法，其特征在于：所述毛細管的材質為玻璃、透明塑料或透明合成樹脂中的任一種。

5.根據權利要求1所述的沙門氏菌檢測方法，其特征在于：所述密封是指用氣密性橡膠或氣密性硅膠帽直接密封。

6.根據權利要求1所述的沙門氏菌檢測方法，其特征在于：所述接入毛細管的培養基盛放在1～10mL容量的管制瓶或1～10mL容量的透明塑料瓶中，管制瓶或透明塑料瓶用氣密性橡膠塞或氣密性硅膠塞密封，毛細管穿過該硅膠塞或橡膠塞。

7.根據權利要求1所述的沙門氏菌檢測方法，其特征在于：所述MSTT培養基的組成為：每1L培養基中，含有以下組分：10.0g蛋白胨，5.0g牛肉膏，3.0g氯化鈉，5.0g膽鹽，50.0g硫代硫酸鈉，10mg煌綠，5.0g碘，6.0g碘化鉀，2.7g瓊脂，40mg新生霉素，余量為蒸餾水。

8.一種用于沙門氏菌檢測的培養基——MSTT培養基，其特征在于：其組成為：1L培養基中，含有以下組分：5.0～10.0g蛋白胨，0～5.0g牛肉膏，0～3.0g氯化鈉，1.0～5.0g膽鹽，30.0～50.0g硫代硫酸鈉，9～10mg煌綠，4.0～5.0g碘，5.0～6.0g碘化鉀，2.5～3.0g瓊脂，0或20～40mg新生霉素，余量為水。

9.根據權利要求8所述的MSTT培養基，其特征在于：每1L培養基中，含有以下組分：10.0g蛋白胨，5.0g牛肉膏，3.0g氯化鈉，5.0g膽鹽，50.0g硫代硫酸鈉，10mg煌綠，5.0g碘，6.0g碘化鉀，2.7g瓊脂，40mg新生霉素，余量為蒸餾水。

10.權利要求8或9所述的MSTT培養基在檢測沙門氏菌中的應用。