[發明專利]一種優化的電穿孔技術轉染懸浮細胞的方法在審
| 申請號： | 201410166759.7 | 申請日： | 2014-04-24 |
| 公開（公告）號： | CN103981218A | 公開（公告）日： | 2014-08-13 |
| 發明（設計）人： | 侯雯婷;蔣衛;李慧;張超;李剛 | 申請（專利權）人： | 北京大學 |
| 主分類號： | C12N15/85 | 分類號： | C12N15/85 |
| 代理公司： | 暫無信息 | 代理人： | 暫無信息 |
| 地址： | 100191*** | 國省代碼： | 北京;11 |
| 權利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 優化 穿孔 技術 轉染 懸浮 細胞 方法 | ||
【權利要求書】：
1.一種轉染懸浮細胞的方法，其特征在于以預熱的含10％血清的RPMI-1640細胞培養基為電穿孔緩沖液，混合細胞與外源DNA混合，然后用電轉化系統進行電轉染，將外源DNA導入細胞內。
2.根據權利要求1所述的方法，其特征在于所述的電轉染緩沖液不含抗生素。
3.根據權利要求1所述的方法，其特征在于所述的預熱環境為37℃恒溫細胞培養箱。
4.一種轉染人CEM×174細胞系的方法，CEM×174細胞系為人T、B淋巴母細胞雜交系，其特征在于，以預熱的含10％血清的RPMI-1640細胞培養基為電穿孔緩沖液，將細胞與外源DNA混合，然后用電轉化系統進行電轉染，將外源DNA導入細胞內，預熱溫度為37℃，所述細胞培養基不含抗生素。
5.根據權利要求1-4任一所述的方法，其特征在于電轉體系中細胞濃度是5×106～1×107個細胞/ml。
6.根據權利要求5所述的方法，其特征在于電轉染條件為，在4mm電極杯中以210mV脈沖電擊一次，持續時間30ms。
7.根據權利要求6所述的方法，其特征在于轉染過程中，細胞濃度∶質粒線性長度∶質粒重量比為106∶1kb∶1μg。
下載完整專利技術內容需要扣除積分，VIP會員可以免費下載。
該專利技術資料僅供研究查看技術是否侵權等信息，商用須獲得專利權人授權。該專利全部權利屬于北京大學，未經北京大學許可，擅自商用是侵權行為。如果您想購買此專利、獲得商業授權和技術合作，請聯系【客服】
本文鏈接：http://www.szxzyx.cn/pat/books/201410166759.7/1.html，轉載請聲明來源鉆瓜專利網。
- 上一篇：一種傳動裝置
- 下一篇：一種光催化有機廢氣凈化機
